NED373389NED
394 Вопросы биотехнологии Материалы и методы В опытах использовали тест-штаммы M. gallisepticum , как сравнительно легко культивируемый, и M. synoviae как штамм трудно растущий на питательных средах. В трех повторностях испытаны жидкие, полужидкие, твер- дые, с добавками и без них питательные среды Фрея, Каган, Эд- варда, Хайфлика, «ВНИИЗЖ». В качестве добавок для сред ис- пользовали пептон, комплекс витаминов для среды Игла, аргинин, талия ацетат, НАД (никотинамидаденина динуклеотид), цистеи- на гидрохлорид, красители фенол-рот или феноловый красный, лошадиную и свиную сыворотки. Жидкие и полужидкие среды разливали по 10 мл в пробирки, а твердые – в чашки Петри. Состав сред, использованных в каче- стве контрольных, указан в табл. 1 (2, 3). Сравнивали среды, приготовленные в ФГУ «ВНИИЗЖ» и ФГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН из дорогостоящих офи- цинальных (5) зарубежных основополагающих компонентов - PPLO-бульона, PPLO-агара, дрожжевого экстракта, сыворотки лошадиной, свиной и из отдельных отечественных ингредиентов – триптического перевара бычьего сердца (ТПБС), ферментатив- ного гидролизата мышечных белков сухого (ФГМС), фермента- тивного гидролизата белков крови сухого (ФГГС), свиной сыво- ротки, дрожжевого экстракта и красителя. Среды, приготовлен- ные из отдельных ингредиентов, были значительно дешевле. Все среды испытывали как с красителем, так и без него. Освежаемые через 10 дней тест-штаммы с активностью 7 lg КОЕ/мл высева- ли по 1 мл, используя по 3 пробирки жидких и полужидких ис- пытуемых сред и по 0,1 мл - в 3 чашки Петри на твердые среды (1 пассаж). Чашки герметизировали пленкой парафильм РМ-996 и инкубировали все посевы при 37 0 С. Затем при появлении ро- ста в течение 5 суток делали пересевы с жидких и полужидких сред на аналогичные (2 пассаж), а уже с этих сред – на твердые. Окончательный учет результатов роста микоплазм проводили на 10 сутки. Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека
RkJQdWJsaXNoZXIy