NED373389NED

362 Болезни птиц Целью нашей работы было сравнение чувствительности РДП и иммуноферментного анализа (ИФА) при обнаружении антигена вируса ИЭП и специфических антител к нему. Материалы и методы Антиген . В качестве антигена использовали очищенный, кон- центрированный центрифугированием супернатант гомогената тканей куриных эмбрионов, зараженных вирусом ИЭП, штамм «Calnek 1143М». Сыворотки крови . В качестве отрицательного контроля исполь- зовали сыворотки крови кур, не имеющие антител к вирусу ИЭП. В качестве положительного контроля – моноспецифическую сыворот- ку крови кур, вакцинированных штаммом «Calnek 1143М». Матери- алом для исследования служили сыворотки с птицефабрик различ- ных регионов России, имеющие разный уровень антител к вирусу ИЭП, определенный в непрямом ИФА с использованием коммерче- ских наборов Avian Encephalomyelitis Antibody Test Kit фирмы «Syn- biotics» (Франция), зарегистрированных на территории РФ. Растворы и материалы, необходимые для постановки реакции. Агар «Дифко» х.ч., натрий хлористый х.ч., дистиллированная вода, 1М раствор едкого натрия, краситель метилоранж, азид натрия х.ч. Постановка реакции . РДП проводили по стандартной методи- ке. Готовили агаровую среду, состоящую из 1,25% агара «Дифко» и 8% раствора NaCl. Каждую пробу испытуемой диагностической сыворотки разводили физиологическим раствором 1:2 и последова- тельным двукратным шагом доводили до разведения 1:256. Пробы очищенного и концентрированного антигена вируса ИЭП исследовали методом последовательных двукратных разведений, на- чиная с цельного разведения и до 1:64. После заполнения лунок чаш- ки Петри помещали во влажную камеру при температуре +37 0 С. Учет результатов проводили через 48-96 ч после постановки реакции. Чаш- ки Петри просматривали на темном фоне в направленном луче света. Реакцию учитывали при наличии линий преципитаций между положительным антигеном и положительной сывороткой, а также отсутствием линий преципитаций между контрольным антигеном и нормальной сывороткой кур. Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека