NED373389NED

358 Болезни птиц Таблица 2 Средняя цилиарная активность трахеи цыплят, зараженных изолятами M. gallisepticum Изоляты M. gallisepticum Средняя цилиарная активность трахеи 7 сут. после заражения 14 сут. после заражения «Магнитогорский» 1,8 2,6 «Красный колос» 2,1 3,5 «Красносулимский» 1,7 2,9 «R» 0 1,2 Таким образом, через 14 сут. после заражения изолятами «Крас- носулимский», «Магнитогорсий» и «Красный колос» отмечалось восстановление эпителия трахеи. Штамм «R» обладал большей патогенностью для цыплят, и после 14 сут. цилиарная активность трахеи не восстанавливалась. Был проведен ПЦР-анализ изолятов с системами праймеров на ген GapA (праймеры предложены Goh M.S. et al.,1998) с последую- щим секвенированием полученных GapA-ампликонов. Секвениро- вание фрагмента гена GapA (332 п.н.) проводили с использованием внутренних праймеров GapA 3F и GapA 4R (Goh M.S. et al.,1998), а также радиоактивно-меченого alpha-32Р-dATP. В результате были получены нуклеотидные последовательности, которые анализи- ровались с помощью программы MEGA (v.3.1) (Kumar, 2004; про- грамма в свободном доступе на сайте http://www.megasoftware.net/) при использовании neighbour-joining-алгоритма с 1000 повторами (replications) bootstrap-теста. Анализ дендрограмм показал, что исследованные изоляты M. gallisepticum отличаются по гену GapA от патогенного штамма R. Изоляты формировали отдельную генетическую группу, близ- кую к слабопатогенному штамму S6. Таким образом, результаты сравнительной оценки патогенно- сти полевых изолятов и штамма «R» M. gallisepticum для цыплят посредством оценки цилиарной активности эпителия трахей сопо- ставимы с результатами, полученными методом секвенирования. Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека