NED365343NED

20 ством сравнительного фенотипического анализа сходных черт у родст- венных генотипов (Lynch, Walsh, 1998). 2.1. Современная парадигма изучения генетических ресурсов рас- тений и методы ее реализации В отличие от этого современная научно-исследовательская пара- дигма изучения и управления ГРР базируется на поиске генов, иденти- фикации их нуклеотидной последовательности и анализе их экспресси- онной активности (Tanksley, McCouch, 1997), прежде всего генов коли- чественных признаков. Так было постулировано, что генетическая из- менчивость большинства количественных признаков, как правило, кон- тролируется несколькими генными локусами с широкими эффектами действия, либо большим числом локусов с малыми эффектами действия. В рамках этой гипотезы распределение эффектов действия генов между локусами может быть описано негативным экспоненциальным распре- делением (Otto, Jones, 2000). И хотя эффекты большинства генов могут быть изучены посредством сегрегационного (классического гибридоло- гического) анализа, целый ряд генов с малыми эффектами действия, до сих пор не поддаются индивидуальному исследованию с помощью тех же методов. Как результат, оценка (доказательство или опровержение) гипотезы негативного экспоненциального распределения эффекта дей- ствия генов остается невозможной. Однако с развитием методов моле- кулярной биологии, с разработкой ДНК-молекулярных маркеров появи- лась возможность изучать не только эффекты действия практически любого гена, но и с помощью методов молекулярного картирования вы- являть их локализацию в геноме. В этой связи, морфолого- фенотипических методы исследований могут быть дополнены молеку- лярно-биологическими методическими приемами и подходами изучения, а также данными по выяснению молекулярно-генетических механизмов действия полигенных систем, включая использование молекулярных маркеров целых геномов для оценки полигенных эффектов действия ко- личественных признаков и взаимодействия «генотип–среда» (Xu, 2003). Так, например, для этих целей можно использовать такие молекулярно- генетические методы как: − RACE — Random Amplified cDNA Ends — ПЦР амплификация неиз- вестной последовательности ДНК с помощью вырожденных прайме- ров в направлении 3'-конца и точных праймеров в направлении 5'- конца; − Genome Walking — прогулка по хромосоме, методы чтения неизвест- ной последовательности ДНК в направлении 5'-конца; − AP-PCR — Arbitrarily Primed PCR — ПЦР амплификация неизвестной нуклеотидной последовательности с использованием единичного