NED365343NED

112 авторами результаты свидетельствуют о том, что практическая изоген- ность интрогрессированных линий весьма относительна. Зная, что в ге- номе в среднем наблюдается несколько десятков генов на сМ (и даже если все они не являются полиморфными), становится ясным, что ин- трогрессированные линии могут существенно отличаться от рекуррент- ной линии по различным признакам. Молекулярно-генетические марке- ры предлагают частичное решение этой проблемы за счет использова- ния, например, методологии полиморфизма длин рестрикных интроду- цированных сегментов . Кроме того, маркеры предоставляют возмож- ность ускорить возврат к изогенности за пределами интродуцированно- го сегмента. В идеале для этого должно быть два типа маркеров: − те, которые фланкируют находящийся под вопросом локус и, тем са- мым, определяют справа и слева «окно», причем таким образом, что- бы можно было выявить ближайший (насколько возможно) кроссовер гена. Практически невероятно, что в одном поколении будет найден целевой двойной рекомбинант. Вследствие этого, выявление кроссо- веров будет происходить последовательно. Сначала в ВС 1 (первое беккроссное поколение) необходимо найти рекомбинацию, произо- шедшую с одной стороны гена, а затем в ВС 2 с другой. Вероятность этих событий может быть определена как функция размера популя- ции и позиции маркеров, находящихся по соседству с геном, что по- зволяет вычислить размер популяции, с которой необходимо произ- водить манипуляции (Hospital, Charcosset, 1997). − те, которые позволят ускорить возврат к рекуррентному родителю и, вследствие этого, они должны быть распределены по всему геному. Как правило, для достижения этих целей порядка двух маркеров на плечо хромосомы вполне достаточно. В основном такие маркеры ис- пользуют после ВС 2 , преимущественно в ВС 3 . Однако они могут быть использованы и на каждом из предыдущих шагов, если в распоряже- нии исследователя имеются несколько растений с благоприятным ре- комбинантным событием. За три поколения с помощью молекулярно-генетических маркеров можно получить такую изогенность, которая будет лучше, чем изоген- ность, полученная традиционными методами селекции. Теоретические исследования показывают, что такая стратегия, по сравнению с тради- ционными технологиями, сокращает время, как минимум, на два поко- ления (Hospital et al., 1992). Это очень хорошо проиллюстрировано экс- периментами на кукурузе (Ragot et al., 1995). Так, ген Bt , который коди- рует инсектицидный белок, был интродуцирован трансгенезом в одну из линий кукурузы. Генетический анализ показал, что Bt располагался в единичном локусе на хромосоме 1. Необходимо было беккроссирова- нием перенести этот ген в другую хозяйственно ценную линию. По-