NED364051NED

238 частота аллеля А у якутского скота, разводимого в тех же условиях, была значительно ниже [12,13]. Величина надоя и скорость молоковыведения выш е у коров красной степной породы с генотипом G/G в сравнении с гомозиготами А /А [13]. У животных черно-пестрой породы не выявлено различий по надою, массовой доли жира и белка в зависимости от генотипа особей. В другой популяции черно-пестрого скота Новосибирской области наблю далось увеличение надоя и продукции молочного жира у гомозигот G /G [12]. Цель работы - изучить полиморфизм гена T N F -a в популяции черно-пестрого скота Западной Сибири и определить связь генотипов S N P T N F -a -824 А/G с признаками молочной продуктивности. Материалы и методы исследований. Для исследования использовалась кровь, взятая из яремной вены 110 лакгирующих коров приобского типа черно-пестрой породы хозяйства С П К «Кирзинский». Средний уровень молочной продуктивности коров в этом хозяйстве равен 6100 кг. Исследование однонуклеотидного полиморфизма проводилось в лаборатории Института цитологии и генетики С О РА Н совм естно с Н.С. Юдиным. Д НК из венозной крови выделяли стандартным методом фенольно-протеолитической экстракции. Фрагмент гена T N F -a крупного рогатого скота между позициями 3090 и 3234 изучали с применением метода П Ц Р-П Д РФ с использованием прямого праймера 5'- C C G A G A A A T G G G A C A A C C T - 3 ' и обратного праймера 5'- G C C A T G T A T C C C C A A A G A A T -3 '. Аллель-специфическую П Ц Р проводили на амплификаторе «Терцик» (ДНК-технологии, Россия) в течение 35 циклов при температуре отжига 60°С. Реакция проходила в П Ц Р S E буф ере G, реакционная см есь объем ом 15 мкл содержала: 0,5 мкг ДНК, по 0,5 мкМ праймеров, 0,2мМ каждого из d N T P и 1,25 ед. Taq- полимеразы. Продукт П Ц Р оценивали вертикальным электрофорезом в 4% ПААГ, окрашивали бромистым этидием. Д алее в продукт амплификации была внесена эндонуклеаза рестрикции E c o lC R i (СибЭнзим, Россия), а затем давали оценку в 4% ПААГ, окрашивали бромистым этидием. Для статистической обработки использовали пакет оф исных программ Libre Office 3.4. Результаты исследований и обсуждение. С реди животных, генотипированных по T N F -a - 824 А /G, было выявлено 33,6% особей с генотипом 824А/А, 42,7% голов-824АЮ и 23,6% голов-824СЛЗ. Результаты распределения генотипов и аллелей приведены в табл.1. Соотнош ение генотипов в изучаемой популяции было 1,42 А/А: 1,81 A/G: 1,0 G/G. Частота аллеля А в 1,22 раза больше, чем аллеля G. А ллель G находится в минорном положении. Н аблю далось достоверное отклонение фактического распределения частот аллелей и генотипов в изучаемой популяции от теоретически ожидаемого.