NED359428NED

центрифужные пробирки, для удаления тканевых конгломератов и соедини­ тельнотканных элемен­ тов. 8. Центрифугировать в те­ чение 5— 10 мин при 600—1200 g, в зависимо­ сти от чувствительности клеток (пересчет оборо­ тов на g облегчает номо- ■ грамма на рис. 12), уда­ лить надосадочную жид­ кость, а к осадку долить постепенно PBS, энергич­ но взболтать осадок, пи- петировать и опять от- центрифугировать. Про­ мывание и центрифуги­ рование повторить три раза. 9. После удаления надоса- дочной жидкости опреде­ лить количество осадка и поместить его в нуж­ ном количестве питатель­ ной среды (для точных исследований подсчитывают количество клеток и концентрацию доводят до 105 клеток на 1 мл) следующего состава: раствор Х е н к с а ........................................ 75% телячья сыворотка . . . . . . 15% 5%-ный раствор гидролизата лакталь- б у м и н а ...................................................... 10% п е н и ц и л л и н ............................................... 100 ЕД/мл стрептомицин............................................... 100 мкг/мл При приготовлении культуры клеток для обычных диагностических исследований нет необходимости каж­ дый раз определять количество клеток во взвеси. Используя постоянно одну и ту же центрифугу, опре­ деленную скорость вращения (или g), можно получать стандартную плотность осадка после последнего про­ мывания клеток. Удобнее приготовлять их взвеси из осадка в определенном соотношении с питательной средой, например 1:100, 1: 200 я т. д., в зависимости7 Рис. 11. Схема соединения ап­ паратуры для проточной непре­ рывной трипсинизации тканей (по Швоблу): / — раствор трипсина; 2 —измель­ ченная ткань; 3 — колба для взве­ си клеток, помещенных в лед; 4 —электромагнитная мешалка. 7 3. Лярски 97 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека

RkJQdWJsaXNoZXIy