NED359428NED

Культуры клеток Данная методика, разработанная для выделения и размножения вируса, принесла большую пользу как в теоретических исследованиях, так и в практической ра­ боте, в том числе и при диагностике вирусных ин­ фекций. В основе метода лежит культивирование не кусков тканей или органов, а клеток, высвобожденных из тка­ ни чаще всего под действием трипсина и других анало­ гичных энзимов (папаин, коллагеназа, эластаза, муказа и т. д.). Использование соответствующего фермента чрезвычайно важно при получении культуры клеток. Некоторые данные показывают, что очищенный трипсин более пригоден для получения изолированных клеток из лабораторных стабильных клеточных линий, в то время как панкреатин лучше всего использовать для обработки тканей животных. Чистый кристаллический трипсин вы­ зывает слипание клеток в виде длинных слизистых ни­ тей, панкреатин же разрывает эти связи благодаря, по- 'видимому, тому, что содержит мукозу. Выделение клеток из ткани возможно также механи­ ческим способом или под воздействием хелатов. Меха­ нические методы пригодны только для разделения эм­ бриональных тканей и в остальных случаях используют­ ся чрезвычайно редко, так как приводят к повреждению клеток, а полученная взвесь не всегда бывает однород­ ной. Хелатирующие вещества, называемые обычно комп- лексонами, — это аминополикарбоновые органические кислоты. В основе их действия лежит способность свя­ зывать комплексы, содержащие кальций. В результате связывания ионов кальция и магния межклеточные свя­ зи ослабевают, и тогда с помощью слабого механичес­ кого воздействия можно получить однородную взвесь клеток. Примером подобного вещества может служить «версен», который по своей химической структуре явля­ ется этилендиаминотетрауксусной кислотой (ЭДТА). Клетки можно культивировать в однослойных куль­ турах или во взвеси. Первый метод, предложенный в 1952 г. Дальбекко, заключается в следующем: единич­ ные клетки прикрепляются ко дну (или стенкам) сосу­ да, в котором растут и размножаются путем деления, пока не образуют монослоя. С этого момента благодаря контактному торможению деление клеток прекращается. 8? Электронная Научная СельскоХозяйственная Библи тека