NED359428NED

Ной жидкости следующего состава: сыворотка ........................................ эмбриональный экстракт . раствор Х е н к с а ........................... пенициллин ................................. стрептомицин................................. 10% 2 % 100 ЕД/мл 100 мкг/мл При снижении pH ниже 7,0 раствор заменяют све­ жим. Метод Майтландов позволяет выращивать мелко нарезанные фрагменты эмбриональных оболочек кури­ цы. Модификацией методики является выращивание ку­ сочков хорион-аллантоисной оболочки, прикрепленной к скорлупе (allantois-on-shell system). Д ля этого скор­ лупу деэмбрионированных яиц (стр. 65) разрезают при­ близительно на 20 частей размером 1X1 см. Метод при­ меняли исключительно при исследовании вирусов гриппа. Заражение культуры тканей По методу висячей капли заражение кусочков ткани производится до начала культивирования. Для этого определенное количество кусочков ткани помещают на 1—2 ч в питательную среду, содержащую вирус, а кон­ трольные кусочки — в такую же среду, но без вируса. Затем проводится культивирование ткани методом ви­ сячей капли. Через определенное время инкубации в контрольных тканях отмечается рост, зараженные ткани не растут. Ткани, выращиваемые методами Карреля и ротаци­ онным, заражают после определенного роста клеток по периметру исходной ткани, обычно, когда ободок дос­ тигает 0,5 мм. Питательную среду отсасывают, вводят взвесь вируса в количестве 0,1 мл и оставляют культуру на 30 мин для адсорбции вируса, после чего добавляют свежую питательную среду. Аналогично поступают с контрольными культурами, в которые вместо вируса до­ бавляют по 0,1 мл жидкости, используемой при приго­ товлении вирусной взвеси. Повреждающее действие вируса выражается в по­ степенном разрушении ободка клеток, окружающих фрагмент первичной ткани. Этот цитопатический эффект сопровождается также изменениями метаболизма. По­ врежденные клетки обнаруживают ослабление интенсив­ ности обмена веществ, а пониженное выделение СОг вы­ 86 Электронная Н учная СельскоХозяйственная Библиотека