NED359428NED

Ткань растет в этом случае быстрее благодаря хоро­ шему поступлению питательных веществ и удалению продуктов жизнедеятельности. Питательную среду ме­ няют каждые 4 дня, при этом необходимо восполнять потери плазмы, возникающие в результате протеолити­ ческого действия ткани. При падении pH ниже 7,0 в про­ межутки между заменами жидкости (это случается при выращивании эмбриональных тканей с активным мета­ болизмом) культуру следует «проветривать». Для этого резиновые пробки заменяют пробками из ваты и раскру­ чивают пробирки в ротационном аппарате. Культура ос­ вобождается при этом от СОг, который, будучи тяжелее воздуха, «выливается», и питательная среда защелачи- вается. В это время пробки вновь заменяются резино­ выми. При культивировании тканей с очень интенсив­ ным метаболизмом можно использовать пробки с про­ пущенными через них стеклянными трубочками, запол­ ненными ватой. Это также способствует удалению из­ бытка СОг- В описанных выше трех методах основой для разви­ вающейся ткани является свернувшаяся плазма. Пред­ принимались попытки заменить ее перфорированными целлофановыми пленками, стекловатой, агаром, тонким слоем пластмасс, а также кусочками ткани, прикрепля­ емыми к разогретым стенкам пробирки при фиксирова­ нии культуры. Однако самой лучшей основой является, по-видимому, куриная плазма, хотя она имеет тот недос­ таток, что разрушается под действием протеолитических ферментов некоторых тканей, что приводит к отрыву их фрагментов от основы. Добавление к культуре соевого ингибитора трипсина в концентрации 0,18 мг на 1 мл питательной среды предохраняет плазму от протеолиза. В методике тканей, взвешенных в жидкости (метод Майтландов), ткань лишена постоянной опоры. Ткань в такой культуре не растет, а только переживает, чего, впрочем, дстаточно для размножения в ней вируса. Признаком жизнедеятельности ткани является измене­ ние pH питательной среды в результате клеточного ме­ таболизма (окисление, связанное с выделением окиси углерода). М е т о д М а й т л а н д о в 0,5 мл тканевой мелко измельченной взвеси поме­ щают 6 колбе Эрленмейера и добавляют 3 мл питатель- 85 Элек ронная Научная Сель коХозяйственная Библиотека