NED359428NED

татком этого метода является незначительное количест­ во выращиваемой ткани, а также невозможность адек­ ватно питать ее длительное время. М е т о д К а р р е л я 1. В чашку Карреля внести 7 капель плазмы и 7 капель эмбрионального экстракта, слегка перемешать. 2. Когда плазма начнет свертываться, поместить в нее 10 кусочков ткани и оставить до следующего дня при 37 °С. 3. Добавить 7 капель плазмы и столько же эмбриональ­ ного экстракта, а после свертывания — 1 мл пита­ тельной среды, инкубировать в термостате. Время появления роста клеток, а также его характер не отличаются от описанных выше. Микроскопируют при небольшом увеличении, приближая перевернутый сосуд Карреля таким образом, чтобы жидкость не каса­ лась пробки. При снижении pH жидкости ниже 7,0 ее следует заменить. pH оценивается путем сравнения цве­ та питательной среды культуры со стандартной жид­ костью с известным pH, содержащей в качестве индика­ тора феноловый красный в такой же концентрации. Д ля более точного сравнения необходимо, чтобы стан­ дартные жидкости находились в таких же сосудах, ка­ кие использовались для культивирования. Метод Кар­ реля позволяет выращивать большее количество ткани и обеспечить ей соответствующее питание. Р о т а ц и о н н ы й м е т о д 1. Внести в пробирку 3 капли плазмы, перевернуть про­ бирку вдоль длинной оси в горизонтальном положе­ нии, чтобы увлажнить стенки плазмой, затем поло­ жить на стол. 2. Поместить в нижнюю часть пробирки на одной линии 6—8 кусочков ткани, промытой в растворе Хенкса, и добавить 3 капли эмбрионального экстракта. 3. После того как плазма свернется, в пробирку доба­ вить 1,5 мл питательной среды следующего состава: сы воротка..................................................... 20% эмбриональный экстракт........................... 15% раствор Х е н к с а ........................................ 65% п е н и ц и л л и н .............................................. 100 ЕД/мл стрептомицин.............................................. 250 мкг/мл 4. Пробирки плотно закрыть резиновыми пробками и поместить в термостат в ротационном аппарате под углом 5° и при скорости вращения 8—10 об/ч. 84 Электронн я Научная СельскоХозяйственная Библиотека