NED359428NED

П риготовление эм брионального э к стр ак та (50%-ный экстракт). 10-дневных зародышей стерильно вынуть из яйца и после удаления глаз тщательно промыть раство­ ром Эрла. Продавить через шприц, добавить к получен­ ной измельченной массе равное количество раствора Эрла. Поставить на 1 ч при комнатной температуре. Центрифугировать в течение 15 мин при 3000 об/мин. В надосадочную жидкость добавить антибиотики, раз­ делить на меньшие количества, закрыть резиновыми пробками и хранить при температуре —20 °С. Перед ис­ пользованием вытяжку разморозить, отцентрифугиро- вать при 3000 об/мин в течение 5 мин для удаления кон­ гломератов. П о л у ч е н и е к у р и н о й п л а з м ы 1. Выщипать перья в области локтевой вены или на грудной клетке в области сердца, продезинфициро­ вать этот участок эфиром или 70%-ным спиртом. 2. Развести в 10 раз исходный раствор гепарина (20 мг на 1 мл 0,85%-ного раствора NaCl) физиологическим раствором. 3. Охлажденные шприцы промыть холодным физиоло­ гическим раствором. 4. Набрать в шприц разведенный гепарин в количестве 1 мл на 20 мл крови. 5. Взять стерильно кровь, лучше всего пункцией сердца. 6. Смешать кровь с гепарином, изменяя положение шприца, вылить ее в охлажденную центрифужную пробирку, помещенную в воду со льдом, и оставить на 20 мин. 7. Центрифугировать в течение 10 мин при 2000 об/мин. 8. Стерильно отсосать плазму. 9. Посеять 0,25—0,5 мл на питательную среду. 10. Сосуды с плазмой поместить в лед и хранить в хо­ лодильнике поблизости от испарителя. Р а б о т а с о с в е ж и м т к а н е в ы м м а т е ­ р и а л о м . 1. Ткань подвергнуть поверхностной стерилизации, дву­ кратно увлажняя ее 96%-ным спиртом и обжигая, за­ тем промыть в PBS. 2. Материал разделить на отдельные ткани, промыть в PBS и разрезать ножницами на мелкие кусочки ве­ личиной 74 —7г спичечной головки. 3. Промывать раствором Хенкса до полного удаления крови. 8? Электр нная Научная Сельск Хозяйственная Б блиотека