NED359428NED

П олучение сыворотки для культуры тканей. Исполь­ зуется чаще всего телячья сыворотка (лучшей является фетальная сыворотка или телят с агаммаглобулине- мией). Сыворотка молодых животных более подходит для культивирования тканей и клеток благодаря нали­ чию в ней фетуина (глюкопротеид а-глобулиновой фракции). После удаления шерсти и тщательной дезинфекции участка кожи над яремной веной в нее вводят толстую иглу, соединенную со стеклянным сосудом трубочкой для обеспечения стерильного взятия крови. Для более легкого удаления сгустка в стерильный сосуд перед взя­ тием крови наливают несколько миллилитров физиоло­ гического раствора, чтобы увлажнить его стенки. Д ля получения большого количества сыворотки не­ обходимо, чтобы свертывание крови происходило в теп­ лом помещении. Если это невозможно, сосуд укрывают толстым слоем ваты минимум на 1—2 ч. Спустя не­ сколько часов, если сгусток не отошел от стенки, его следует осторожно отделить от поверхности стенок сте­ рильной пипеткой или стеклянной палочкой. Сосуд с кровью оставляют при комнатной температуре до сле­ дующего дня, затем тщательно центрифугируют. Даже следы эритроцитов или высвобожденный гемоглобин оказывают тормозящее действие на рост культуры тка­ ней. Прозрачную сыворотку разливают в стерильные пробирки, закрывают резиновыми пробками и хранят в холодильнике. Выпадение с течением времени осадка не свидетельствует о непригодности сыворотки, однако хранить ее не следует более 2 месяцев. Некоторые сыворотки, взятые от абсолютно здоро­ вых животных, оказывают токсическое действие на клетки, поэтому сыворотку надо брать от нескольких животных и путем предварительных исследований вы­ явить ту, при добавлении которой отмечается наилуч­ ший рост культуры тканей. Иногда токсичность отдель­ ной сыворотки можно уменьшить, смешивая несколько сывороток. Случается, что свежевзятая сыворотка не под­ держивает рост культуры клеток, но через несколько дней консервации в холодильнике становится идеальной питательной средой. Поэтому свежие партии сыворотки следует заготовлять как можно раньше, чтобы можно было по меньшей мере дважды определить ее пригод­ ность для использования в культуре. 8 ! 6 3. Лярсцн Электронная Научная СельскоХ зяйственная Библиотека