NED359428NED

Рис. 10. Схематический рисунок деэмбриониро- ванного яйца (по Гро- элю)| 1 —колпачок; 2 —скорлу­ па яйца; 3 — подскорлуп- ная оболочка; 4 —хорион­ аллантоисная оболочка; 5 — питательная среда. лупой вызывает позднее полную отслойку оболочки в течение 1— 2 дней. После удаления зародыша оболочку, выстилающую яйцо, не­ сколько раз промывают физиоло­ гическим раствором, охлажден­ ным до температуры льда, до тех пор, пока жидкость не станет прозрачной. Затем в полость яй­ ца вводят 20 мл питательной сре­ ды, подогретой до 37 °С, и яйцо закрывают стерильным резино­ вым колпачком, предварительно погрузив его в парафин. В виде, наиболее удобном для манипуля­ ций, яйцо представлено на ри­ сунке 10. Вмонтированная труб­ ка с резиновой пробкой обеспе­ чивает как взятие, так и введе­ ние жидкости без опасности бак­ териального заражения. Такой биологический объект сохраняет жизнеспособность в течение нескольких дней. При оригинальной методике деэмбрионированные яйца инкубируют в ротационном термостате (отклоне­ ние от оси на 45°) при 6—8 об/ч, что также часто при­ водит к отслойке оболочек. Поэтому яйца лучше время от времени переворачивать вручную. Характер и состав питательной среды зависят от ви­ да вируса и целей размножения, но в основном не отли­ чаются от сред, используемых при культивировании кле­ ток и тканей зародыша. Например, интенсивное размно­ жение вируса псевдочумы наблюдается при использова­ нии среды № 199 следующего состава: о б ъ е м ............................................ 450 мл амниотическая жидкостькоровы . . 450 мл инактивированная телячьясыворотка 100 мл п е н и ц и л л и н ............................................... 100 000 ЕД стрептомицин.............................. 100 мг экстракт д р о ж ж е й ................. 1 г феноловый красный как показатель pH, который с по­ мощью NaHCOs устанавливают 7,2. В предложенной йошино и др. [208] методике при­ готовления деэмбрионированных яиц полость яйца за­ 67 5* Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека