NED359428NED

два стакана различной емкости (легко стерилизующие­ ся), которые можно поместить в сосуд с охлаждающей жидкостью. Для приготовления взвеси используют жидкости, ох­ лажденные до 0°С. Как правило, готовят 10%-ные взвеси (иногда 5—20%-ные). Это означает, что одна часть ткани растирается в 10 объемах жидкости. Физио­ логический раствор в большинстве случаев непригоден в качестве растворителя. Чаще используются питатель­ ный бульон, триптозо-фосфатный бульон, PBS, PBS с 10%-ной инактивированной нормальной сывороткой и другие сбалансированные растворы, используемые в культуре клеток. К растворам, используемым для при­ готовления взвеси, добавляют антибиотики в количест­ ве, зависящем от предполагаемого бактериального обсе­ менения присланного материала. Обычно это количест­ во составляет от 500 ЕД пенициллина и 500 мкг стреп­ томицина на 1 мл раствора до 10 000 ЕД и 100 000 мкг антибиотиков. Можно также использовать неомицин и тетрациклин и противогрибковые препараты (нистатин)» Для приготовления взвеси из мягких тканей, напри­ мер мозга, удобно использовать стеклянные ступки, ко­ торые обеспечивают полное размельчение даже очень маленьких количеств материала. Вместо такой ступки можно в крайнем случае использовать две пробирки, одна из которых довольно плотно входит в другую. После гомогенизации взвесь, разбавленную соответ­ ствующим образом, центрифугируют в течение 15— 30 мин в холодной комнате или в центрифуге с охлаж­ дением, после чего надосадочную жидкость оставляют на 30 мин в холодильнике (время для действия анти­ биотиков) . Если материал не может быть сразу использован для введения в биологические объекты, его необходимо за­ морозить и сохранять при —70 °С (вирусы оспенной группы при —20 °С). Однако в тех случаях, когда нет возможности использовать материал, например нет жи­ вотных, культуры клеток, эмбрионов и т. д., то лучше отложить приготовление взвеси, а материал сохранить в исходном виде (меньше потери вируса). Взвеси материалов в виде смывов из носа, глотки, влагалища и т. д., взятых описанным ранее (стр. 23) способом, получают, выжимая ватные тампоны, добав­ ляют антибиотики (независимо от того, добавлялись ли 48 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека