NED359428NED

следуемом материале. Типичным примером может слу­ жить постановка РСК для обнаружения вируса ящура (стр. 374), позволяющая при использовании специфи­ ческих сывороток не только быстро установить нали­ чие вируса, но и определить его тип. П о с т а н о в к а р е а к ц и и (по Хоскинсу [78]) 1. Приготовить 2%-ную взвесь сенсибилизированных эритроцитов барана в вероналовом буфере и оста­ вить до следующего дня при 4 °С. 2. Приготовить ряд разведений (от неразведенного материала до 1:64) неизвестного (исследуемого) вируса в вероналовом буфере в объеме 1 мл. 3. Приготовить нормальный неинфекционный контроль­ ный антиген, его используют в реакции неразведен- ным, т. е. соответствующим самому низкому разве­ дению исследуемого вируса. 4. В лунки на пластине перенести по 0,1 мл каждого разведения исследуемого вируса. 5. Во все лунки добавить по 0,1 мл стандартной сыво­ ротки (референс), разведенной в вероналовом буфе­ ре таким образом, чтобы в 0,1 мл содержалось 2 единицы (т. е. в разведении, в 2 раза меньшем, чем оптимальное, дающее полное связывание комплемен­ та при наивысшем разведении антигена). 6. В каждую лунку добавить по 0,1 мл комплемента, разведенного в вероналовом буфере так, чтобы он содержал точно две минимальные гемолитические дозы (МГД); 1 М Г Д — это 0,1 мл наивысшего раз­ ведения комплемента, дающего полный гемолиз. 7. Поставить следующий контроль, используя по одной лунке (если нет других рекомендаций) на каждый вариант. а) проба на антихсмплементаряое действие, неизвестного вируса: 0,1 мл разведенного вируса (от неразведенного до 1:64) 0,1 мл вераналового буфера 0,1 мл комплемента б) проба яа неспецифическую реакцию стандартной сыворотки с контрольным невифекционным антигеном: 0,1 мл неразведенного нежфекцяанного контрольного антигена 0,1 мл стандартной сыворотки 0,1 мл комплемента в) проба на аятшсомплемеятарную активность стандартной сыво­ ротки: 0,1 мл стандартной сыворотки 0,1 мл вераналового буфера 0,1 мл комплемента 40 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека