NED359428NED

6. Препарат промыть трижды по 20 минут в PBS. 7. Фиксировать 100%-ным спиртом в течение 15 мин, промыть в дистиллированной воде и высушить при комнатной температуре. 8. На препарат нанести несколько капель реактива ДАБ (см. ниже). 9. Через 10 мин препарат промыть водой, высушить, за­ лить бальзамом. Реактив ДАБ приготовляется следующим образом: 25 мг ДАБ (четыреххлористый водород 3,3-диаминобен- зидина) растворить в 100 мл 0,05 М трис -буфера с pH 7,5 или в лимоннокислом буфере с pH 5,0 (0,05 М ли­ монная кислота, нейтрализованная 0,5 М уксуснокис­ лым аммонием). При смешивании 25 мл этого раствора ДАБ с 3 мл 0,05 %-ной Н20 2 получается реактив ДАБ (приготовлять e x tem p o re). Иммуноэлектроиомикроскопмя Сущность метода заключается в обнаружении анти­ гена с помощью меченых антител, определяемых в электронном микроскопе. Для метки антител чаще все­ го используется ферритин. Меченые комплексы, получа­ емые при идентификации пероксидазы, можно наблю­ дать в электронном микроскопе. Подробное описание этих методик мы опускаем, т. к. они используются пре­ имущественно в научных исследованиях для определе­ ния локализации антигенов. Реакция связывания комплемента (РСК) В основе реакции лежит связывание комплемента специфическим комплексом антиген — антитело (первая фаза реакции). Образование этой связи проверяется во второй фазе реакции путем добавления к комплексу сен­ сибилизированных эритроцитов, т. е. эритроцитов, обработанных специфическими для него антителами (гемолитический амбоцептор). Эритроциты подвергнут­ ся гемолизу только в том случае, если комплемент не 38 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека