NED359428NED

Одновременно с опытной ставят следующие контрольные проб» специфичности конъюгата (цит. по Спендлову [214]): — отсутствие специфического свечения немеченными антителами; — уменьшение интенсивности свечения после предварительного до­ бавления к конъюгату гомологичного антигена; — отсутствие свечения после окрашивания конъюгатом нормальных неинфицировашых тканей или зараженных другим неродствен­ ным возбудителем; — отсутствие свечения инфицированных тканей после окрашивания их конъюгатами, приготовленными .из неиммунных сывороток или из гетерологичных иммунных сывороток. С целью упрощения и сокращения времени иденти­ фикации в непрямой реакции ИФ можно использовать смесь антител для нескольких вирусов. Так, при иссле­ довании вирусных инфекций дыхательных путей у че­ ловека показана возможность одновременного использо­ вания девяти разных сывороток. Иммунопероксидаэная реакция Суть метода та же, что и при реакции ИФ, с тем отличием, что специфические антитела конъюгата ме­ чены энзимом — пероксидазой хрена. Следовательно, эта реакция иммуноэнзиматическая. Большим ее пре­ имуществом при рутинных исследованиях является воз­ можность просмотра препаратов под обычным микро­ скопом. Как и при реакции иммунофлюоресценции, здесь тоже применяют два метода. При прямом методе ис­ пользуют противовирусный конъюгат, при непрямом — конъюгат против гамма-глобулинов, которые были свя­ заны с антигеном в первой фазе реакции. Мечение ан­ тител пероксидазой (приготовление конъюгата) прово­ дят чаще всего по методу Аврамса {7]. Этот метод от­ носительно прост, однако по причинам, рассмотренным нами выше, здесь, как и при реакции иммунофлюоре­ сценции, рекомендуется применение готовых промыш­ ленных конъюгатов. П о с т а н о в к а р е а к ц и и (цит. по Курстаку) При исследовании инфицированных вирусом одно­ слойных клеточных культур реакция ставится следую­ щим образом. 1. Клетки (на покровных стеклах) промывают в PBS и фиксируют при комнатной температуре так же, как и при постановке реакции ИФ. Наиболее часто ис- 36 Электрон ая Научная СельскоХозяйственная Библиотека