NED359428NED

в противном случае происходит значительное пониже­ ние титра под влиянием хлороформа, очевидно, в ре­ зультате преципицатии вирусных частиц с белковой фракцией суспензии (Бёгель и Майр [12]). Предотвра­ тить такое понижение титра можно путем заморажи­ вания суспензии и обработки ее трипсином (инкубиро­ вание с добавлением 0,5%-ного трипсина на водяной бане при температуре 37 °С в течение двух часов) или сапонином (инкубирование с добавлением 1%о сапонина при 4°С в течение 30 мин). Наилучшие результаты по­ лучают, сочетая замораживание с обработкой сапо­ нином. Точную идентификацию выделенного энтеровируса проводят в реакции серонейтрализации в культурах клеток с использованием специфических сывороток. Наиболее обширную серологическую классификацию энтеровирусов крупного рогатого скота, выделенных в разных частях света, осуществили Л а Плака и др. [123]. Полученные результаты позволили им выделить две серологические группы, включающие по 11 серотипов. Было показано, что наиболее пригодны для типирова- ния в реакции серонейтрализации иммунные сыворотки, полученные путем гипериммунизации кур. Кролики не годятся для этой цели, так как даже их нормальные сыворотки обнаруживают весьма четкое нейтрализую­ щее действие (белковые ингибиторы) для всех энтеро­ вирусов крупного рогатого скота, кроме того, гиперим­ мунизация не дает сывороток с высоким титром. В идентификации штаммов лучшие результаты дает реакция серонейтрализации при использовании постоян­ ной дозы сыворотки и серийных разведений вируса. Установлено, что все изолированные до сих пор штам­ мы первой группы обладают свойствами гемапглютина- ции по отношений) к эритроцитам обезьяны резус, в то время как все штаммы второй группы не обнаружи­ вают таких свойств. Этим можно воспользоваться как дополнительным критерием при ориентировочной идентификации энтеровирусов. В реакции гемагглютина- ции исследуют поддерживающую среду (без сыворотки) культуры клеток, взятую после установления цитопа- тического эффекта. Приготовленные разведения смеши­ вают с 0,5%-ной суспензией эритроцитов в забуферен- ном физиологическом растворе, инкубируют в течение одного часа при комнатной температуре или 15 мин в 362 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека