NED359428NED

Вирус можно также изолировать путем интрацереб рального заражения мышат-сосунов в возрасте 1—3 дней. Спустя 1—2 дня отмечаются нервные явления, а в конечной стадии болезни параличи — животные гиб нут в течение 5—10 дней после инокуляции. Заражение культуры клеток. Вирус хорошо размно жается в культурах различных клеток свиньи. Исполь зуют как первичные культуры, так и перевиваемые ли нии (например, IB = R S 2 или SN H ). Цитопатический эффект развивается уже через 24 ч, а на следующий день может произойти полный распад культурального слоя. Идентификацию проводят с помощью известной поло жительной сыворотки. Быстрее всего можно получить результат, применяя реакцию иммунофлюоресценции в зараженной культуре на покровном стеклышке. Если в исследуемом материале из везикул имеется вирус, положительный результат реакции получают уже через 3—5 ч после заражения культуры. Это равнозначно идентификации вируса. Провести ее можно в культурах при помощи реакции серонейтрализации (подавление цитопатогенного действия вируса) или реакции связы вания комплемента. Серологическое исследование Параллельно с развитием инфекции у животного очень быстро появляются нейтрализующие антитела, которые можно выявить уже спустя 4 дня после зара жения. Самые высокие титры антител устанавливают на 10-й день после заражения. Это может быть величи на порядку 1:16000 Помимо нейтрализующих антител, появляются так ж е комплементсвязывающие (из-за прокомплементар- ных свойств сывороток свиней реакция связывания комплемента не находит широкого применения), и преципитирующие. Последние можно также определить количественно при помощи реакции радиальной преци питации в агаровом геле. Д ля этого приготовленный соответствующим образом антиген растворяют в геле и после его застывания в проделанные отверстия вводят исследуемые сыворотки. Широта зоны преципитации позволяет сделать вывод относительно количества антител. Можно также применять различные разведе ния исследуемых сывороток. 360 Электр нная Научная СельскоХозяйственная Библиотека