NED359428NED

нее (стр. 296), с той разницей, что взвесь коалина при­ готовляют на боратном буферном растворе с pH 9,0. Д ля удаления неспецифических гемагглютининов к 5 мл адсорбированной сыворотки добавляют 0,1 мл взвеси эритроцитов. Смесь держат при комнатной температу­ ре в течение 20 мин, затем центрифугируют и надоса- дочную жидкость используют в реакции. Второй ме­ тод — экстракция ацетоном — особенно полезен при исследовании сывороток птиц, а также других видов животных и людей. По этому методу сыворотки обрабатывают следу­ ющим способом (цит. по [89]). Сыворотку разводят PBS до концентрации 1:10, охлаждают в ледяной бане и добавляют 12 объемов охлажденного ацетона. Экстракцию продолжают в те­ чение 5 мин, встряхивая время от времени содержимое сосуда, затем центрифугируют при 2500 об/мин в тече­ ние 5 мин, отсасывают надосадочную жидкость и сли­ вают ее. К осадку снова добавляют то же количество ацетона, проводят вторичную экстракцию и центрифу­ гирование. Ацетон отсасывают, осадок высушивают под вакуумным насосом в течение 15—20 мин, после чего растворяют в боратном буфере с pH 9,0 до исходной концентрации 1:10. Методы серонейтрализации и редукции числа бля­ шек рассматривались нами при описании идентифика­ ции вируса. Нейтрализующие антитела могут появляться в сы­ воротках очень рано, иногда даже до клинического про­ явления заболевания. В этих случаях при исследовании парных сывороток выявить нарастание титра антител в реакции серонейтрализации бывает труднее, чем в реак­ ции связывания комплемента. Другим фактом, который следует принимать во внимание, является падение актив­ ности лабильного фактора, особенно важного в реак­ ции серонейтрализации (феномен CRN, стр. 185) при длительном хранении сывороток (это характерно осо­ бенно для антител к вирусам группы В). Интенсивность этой инактивации зависит от условий хранения сыво­ роток (наименее выражена в замороженных сыворот­ ках). Л и т е р а т у р а : [6]; [37]; [38]; [81]; [89]; [95]; [205]f [251]. 338 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека