NED359428NED
штамма, представляющие эти подгруппы: RSV-RAV-1, RAV-2 (штамм «Шмидт-Руппин»), штамм «Карр- Зильбер» и штамм «Бриан» стандартный. Реакция связывания комплемента (COFAL-тест), (англ. — Complement Fixation Avian Leukosis). Реак ция заключается в индикации с помощью известной положительной сыворотки группоспецифического (gs) антигена вирусов лейкоза кур в исследуемом материа ле. Так как реакция группоспецифическая, положитель ный результат должен быть получен при использовании сыворотки для любого серотипа. Антиген gs можно об наружить в жидкости и клетках зараженных культур, а также внутри частиц вируса. COFAL-тест непригоден для непосредственного выделения вируса на заражен ных эмбрионах. Было показано, что 50—90% здоровых эмбрионов несут антиген g s e мозге, печени, кишечни ке, почках, легких и желчном пузыре. Исследуя куриные эмбрионы, необходимо из них сначала приготовить культуры фибробластов, которые in v itr o уже не проду цируют этого антигена. Обнаружение его в культурах служит доказательством того, что эмбрионы были за раженными. Специфическую положительную сыворотку, употреб ляемую при проведении теста, получают либо от гипе- риммунизированных антигеном gs (полученным путем разбивания вирионов) кроликов, либо от хомяков, за раженных в первый день жизни и обескровленных после развития опухоли, либо, наконец, от голубей, у которых развитие опухоли вызвано путем заражения вирусом. Постановка COFAL-теста в принципе не отличается от известной методики постановки реакции связывания комплемента. Однако большинство авторов использу ют микрометоды, которые являются модификацией ме тода Фултона и Думбелла (см. стр. 207), т. е. основаны на определении максимального количества комплемен та, связываемого постоянным количеством (4—8 ком- плементсвязывающих единиц) сыворотки, а не на оп ределении самого высокого разведения сыворотки, свя зывающей определенную дозу комплемента. Результат COFAL-теста считают положительным (при правильных контролях), если в исследуемой систе ме окажется связанным более чем 1,5-кратное количе ство комплемента по сравнению с контролем (обычно по отношению к 50%-ному гемолизу). При использова 316 Электронная Научная СельскоХозяйственная Биб иотека
RkJQdWJsaXNoZXIy