NED359428NED

еле заражения их вирусом саркомы Рауса, Первый изо­ лированный Рубином фактор, который обладал этим свойством, был назван «фактором, вызывающим рези­ стентность» (англ,—Resistence Inducing Factor, R IF ),Он оказался идентичен вирусам лейкозов птиц. Тест ставится следующим образом. Культуру фибробластов куриных эмбрионов с из­ вестной генетически обусловленной восприимчивостью к вирусам лейкоза заражают суспензией исследуемого материала и делают не менее трех пассажей культуры с интервалом 3—4 дня. Клетки выращивают в чашках Петри в термостате, через который пропускают 5%-ный СО 2 , или во флаконах Карреля, закрытых резиновыми пробками в обычном термостате. Снимают слой куль­ туры клеток со стенки сосуда с помощью 0,05%-ного раствора трипсина. Часть культуры клеток с каждого пассажа зараж а­ ют вирусами саркомы Рауса отдельно (до настоящего времени известны четыре подгруппы — А, В, С и D ). Можно также вместо пассажей культуры переносить ростовую среду инокулированной культуры к новым культурам каждые четыре дня. В таком случае кон­ трольное заражение вирусом саркомы Рауса производят в течение 4—6 дней после инокуляции культуры. В качестве контроля служат культуры, зараженные известным вирусом лейкоза, и незараженные культуры. И те и другие заражают вирусом саркомы Рауса. Спустя 8—11 дней на них появляются очаги трансфор­ мированных клеток. Доказательством присутствия вируса лейкоза в ис­ следуемом материале служит снижение не менее чем в 10 раз (по сравнению с контролем) числа очагов транс­ формации в зараженных им культурах после введения стандартного штамма вируса саркомы Рауса. При исследовании куриных эмбрионов на зараже­ ние их вирусами лейкоза на 9—11-й день инкубирова­ ния из них приготовляют культуры фибробластов в пла­ стинах или флаконах Карреля. Проводят 3 пассажа культуры клеток с целью накопления вируса (если за­ родыши были заражены) и контрольное заражение ви­ русом саркомы Рауса. Реакция RIF является специфичной для отдельных подгрупп — А, В, С, D, и поэтому для контрольного за­ ражения следует использовать соответствующие четыре 315 Электронная Научная СельскоХ зяйственная Библиотека