NED359428NED

Авторы метода подчеркивают ее ценность для диагно­ стики случаев заболеваний, вызванных штаммами с ослабленной вирулентностью. Биологическая проба. Главным образам используют молодняк крупного рогатого скота, так как овцы и козы менее восприимчивы. Животным вводят подкожно исследуемый материал в дозе 10 мл. Это неразбавленная кровь или 10—20%-ная суспензия селезенки и лимфа­ тических узлов. На положительный результат указыва­ ет подъем температуры тела спустя 5 дней после зара­ жения и последующее развитие типичной картины болез­ ни (в том числе характерные изъязвления слизистой оболочки ротовой полости). Смертельность очень высо­ к а я — около 90%. В случае выздоровления животных дополнительным критерием специфичности течения болезни является рост уровня антител. Заражение культуры клеток. Используют культуру клеток почки телят, которую после удаления ростовой среды заражают, нанося на слой клеток суспензию лейкоцитов исследуемого животного или суспензию его органов. Д ля адсорбции вируса культуры выдерживают два часа при температуре 37 °С, после чего инокулят отса­ сывают и вводят ростовую среду. За культурой на­ блюдают в течение 9—18 дней. На положительный результат указывает ЦПЭ, который характеризуется появлением округлившихся клеток, возникновением мно­ гоядерных синцитиев и распадом слоя культуры. При отсутствии ЦПЭ делают слепой пассаж. Обычно для изоляции вируса таким методом необходимо затратить 20—25 дней. Идентификацию проводят при помощи реакции ней­ трализации. Серологическое исследование Чаще всего применяют реакцию связывания комп­ лемента. Реакцию серонейтрализации можно ставить на кроликах, имея лапинизированный штамм. Учитывая ж е большую стоимость этого метода, используют его крайне редко. Реакция же в культурах клеток с использованием адаптированных к ним штаммов — метод более простой 308 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека