NED359428NED

эритроцитов, встряхивают и помещают на водяную баню при температуре 37 °С на один час. Получаемая после центрифугирования надосадочная жидкость представ­ ляет собой разведение сыворотки 1 :4, из которого при­ готовляют следующие разведения. Большинство авторов считают, что в сыворотках крупного рогатого скота нет веществ, тормозящих не­ специфическую гемагглютинацию (ингибиторов). Для постановки РТГА применяют метод серийных разведений сыворотки (инактивированной при темпе­ ратуре 56 °С в течение 30 мин) с постоянной дозой (4 гемагглютинационные единицы) вируса. Смеси инкуби­ руют при комнатной температуре, затем добавляют эритроциты. Титр выше 1 :8 считается положительным. В массовых исследованиях для упрощения делают также разведения исследуемых сывороток сразу в 0,5%- ной суспензии эритроцитов морской свинки (в первой— 1%-ная — добавление одинакового объема сыворотки даст конечную концентрацию эритроцитов 0,5%) в объ­ еме 0,25 мл и добавляют 4 гемагглютинационные еди­ ницы вируса в 0,25 мл. В этом случае, как видим, для воздействия сыворотки на вирус нет времени. Во многих лабораториях, где в рутинных исследова­ ниях еще не применяют культуры клеток, диагностика базируется на серологических исследованиях. Бёгель [16] подчеркивает необходимость учета отдельных важ­ ных моментов для получения по возможности досто­ верных результатов этих исследований. Речь идет о том, чтобы исследовать больше парных сывороток и брать их от животных старше четырех месяцев. В этом случае удастся избежать появления антител, передаваемых матерью. Первую пробу крови необходимо брать как можно раньше — на самой ранней фазе болезни, вто­ рую — спустя 8— 10 дней. У многих животных уровень антител торможения гемагглютинации достигает вре­ менно самого высокого титра примерно на 14—20-й день после заражения, в последующие дни снижается, а затем удерживается без изменений в течение несколь­ ких месяцев и даже лет. Так, сыворотка, взятая при­ мерно на 10-й день после заражения, имела титр 1 :Т6, а спустя 2 недели —1 :32, т. е. нарастание титра стати­ стически недостоверно, что для постановки диагноза недостаточно. Если бы вторая проба крови была взята 297 Электронная Науч ая СельскоХозяйственная Библиотека