NED359428NED

но после 1—2 пассажей на эмбрионах, выделение же вируса A/equi 1 более сложно й требует нескольких сле­ пых пассажей. Для идентификации вируса проще всего применить реакцию торможения гемагглютинации с известными диагностическими сыворотками для обоих вирусов. Серологическое исследование Используют реакцию связывания комплемента (РСК) или реакцию торможения гемагглютинации (РТГА). Сыворотки, предназначенные для РСК, инактивируют при температуре 56 °С в течение 30 мин. Сыворотки же, предназначенные для исследования в РТГА, инактиви­ руют при температуре 60 °С в течение 30 мин, а затем дополнительно подвергают их действию K J0 4 для уда­ ления неспецифических ингибиторов. Делают это следующим образом. Одну часть сыворотки смешивают с тремя частями свежеизготовленного (или хранившегося в холодильни­ ке не более нескольких дней) М/90 раствора K J0 4 (0,255 г K J0 4, дистиллированной воды ad 100). Смесь оставляют при комнатной температуре на 15 мин, затем добавляют 3 части 1%-ного раствора гли­ церина в физиологическом растворе для нейтрализации излишков K J0 4, а также 3 части физиологического раст­ вора и держат при комнатной температуре в течение следующих 15 мин. Сыворотку, обработанную таким способом (разведение ее составляет 1 : 10 ), используют для РТГА. Иенсен рекомендует простой и эффективный метод удаления всех известных ингибиторов миксовирусов. К одному объему сыворотки добавляют 0,5 объема раствора трипсина «Дифко» 1 :250 (0,8 г в 100 млМ/10 фосфатного буфера с pH 8,2). Этот раствор при таком pH неустойчив, однако в замороженном состоянии со­ храняет активность в течение длительного времени. Смесь инкубируют при температуре 56 °С в течение 30 мин, затем охлаждают до комнатной температуры, добавляют 3 объема М/90 K J0 4, инкубируют 15 мин при комнатной температуре и нейтрализуют тремя объема­ ми 1 %-ного раствора глицерина в физиологическом растворе. Смесь оставляют еще на 15 мин при комнат­ ной температуре. 287 Электронная Научная Сельс оХозяйственная Библиотека

RkJQdWJsaXNoZXIy