NED359428NED

в желточный мешок, введенный в практику Бюловым [30, 31]. Заражают эмбрионы в возрасте четырех дней. Для этого берут обычно 12 куриных эмбрионов, чтобы быть уверенным, что хотя бы 8 из них можно будет оценить в течение 12— 14 дней периода наблюдений. Материал вводят иглой вертикально через воздушную камеру на глубину 24—30 мм, в зависимости от величи­ ны яйца. Это важно во избежание инокуляции хорион­ аллантоисной оболочки, что могло бы вызвать реакцию «трансплантат против хозяина», так как в данном слу­ чае в эмбрион вводят живые чужеродные клетки. Яйца инкубируют в вертикальном положении, не меняя его в течение 9— 14 дней, при температуре 38 °С. Эмбрионы, погибшие до 9-го дня, выбрасывают. Инфицированные эмбрионы исследуют обычно на 12-й день после инфекции, несмотря на то, что первые изменения, специфичные для болезни Марека, можно выявить уже на 9-й день. Наблюдаемые изменения — это довольно равномерно рассеянные по всей поверхно­ сти хорион-аллантоисной оболочки очаги уплотнения ве­ личиной с булавочную головку, иногда больше. Их услов­ но обозначают следующим образом: (—) — нет измене­ ний; ( + ) — от 1 до 20 очагов; ( + + ) — от 21 до 100 очагов; ( + + + ) — более 100 очагов на поверхно­ сти хорион-аллантоисной оболочки. Если очаги уплот­ нения размещены на небольшом пространстве, можно предположить, что их появление есть результат реак­ ции «трансплантат против хозяина», вызванной случай­ ным попаданием инфицированного материала на хори- он-аллантоисную оболочку или рядом с ней, т. е. что эти очаги неспецифичны для вируса. Кроме изменений, наблюдаемых на хорион-аллантоисной оболочке, у ин­ фицированных куриных эмбрионов увеличивается селе­ зенка (спленомегалия). За положительный результат исследования прини­ мается тот, при котором после заражения возникает 20 или больше очагов примерно у 30% куриных эмбри­ онов. Специфичность изменений можно подтвердить ре­ акциями иммунофлюоресценции преципитации в геле и связывания комплемента. Больше всего вируса содер­ жится в селезенке и фабрициевой сумке куриных эмбри­ онов. Заражение культур клеток. Этот метод выделения вирусов не отличается по чувствительности от метода 271 Электро ная Научная СельскоХозяйственная Библиотека