NED359428NED

точный вирус, который обнаруживается в коже и фол­ ликулах перьев. Клетки опухоли или органов получают трипсинизи- рованием их 0,25%-ным трипсином (Дифко) при 37 °С и последующим промыванием в PBS. После подсчета клеток приготовляют их взвесь (не менее 105 на дозу) в среде 199 с добавкой 200—500 ЕД пенициллина и 200—500 мкг стрептомицина на 1 мл. Клетки можно со­ хранять в присутствии 7,5% DMSO в замороженном состоянии при температуре жидкого азота. Кровь, как правило, берут пункцией из сердца шприцем — 4 части крови на 1 часть 3,8%-ного раство­ ра лимоннокислого натрия. Биологическая проба. Наиболее восприимчивы к за­ ражению суточные цыплята, не содержащие материн­ ских антител к вирусу и происходящие из линии с вы­ раженной генетически обусловленной восприимчивостью к вирусу болезни Марека, например линии Cornell S, H PR S—RIR или Athens-Canadian. Цыплят заражают внутрибрюшинно или подкожно, используя обычно 4— 10 животных на опыт. Время наблюдения для обнару­ жения антигенов в коже и микроскопических изменений равно 3 неделям, для обнаружения макроскопических изменений — 6—8 неделям и для обнаружения анти­ тел — 4—8 неделям. Клинические симптомы отличаются разной степенью интенсивности. Характерными симпто­ мами являются парезы и параличи ног, крыльев, шеи, зоба, функциональные нарушения пищеварительного тракта, изменения глаз, кахексия. Антигены в коже обнаруживаются при помощи реак­ ции преципитации в геле и иммунофлюоресценции. Лучше всего использовать для этого замороженные ку­ сочки кожи. Такая серологическая идентификация не­ обходима, с одной стороны, потому, что встречающиеся в природных условиях штаммы с низкой патогенностью могут вызвать у лабораторных животных слишком сла­ бые изменения; с другой стороны, отличающиеся по антигенным свойствам вирусы лейкоза птиц и ретикуло- эндотелиоза (штамм Т) могут вызывать изменения, очень сходные с теми, которые наблюдаются при бо­ лезни Марека. Заражение куриных эмбрионов. Широкое распрост­ ранение благодаря своей простоте, экономичности и чувствительности получил метод заражения эмбрионов f f O Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека