NED359428NED

Выпускаемые промышленностью компоненты реак­ ции имеют точное обозначение активности (титр, актив­ ность) , а также срока годности. Несмотря на это, все же рекомендуется периодическая проверка их пригодности в РСК. Гемолитический амбоцептор (гемолитическая сыво­ ротка, или сыворотка кролика, иммунизированного эри­ троцитами барана) титруется методом «шахматной доски» с использованием двукратно возрастающих раз- ведений амбоцептора (от 1:25) и возрастающих в ариф­ метической прогрессии (1:30, 1:40, 1:50 и т. д.) раз- ведений комплемента. Оптимальным считается то наи­ высшее разведение амбоцептора, которое вызывает полный гемолиз при самом высоком разведении компле­ мента. Такое разведение амбоцептора в использованном в реакции количестве содержит 1 гемолитическую еди­ ницу. В основной РСК используют, как правило, 2 гемо­ литические единицы. Если, например, титр гемолитиче­ ской сыворотки при ее предварительном титровании был равен 1:400, то в основной реакции используют ее в разведении 1:200. Периодической проверке подвергают также стандарт­ ный антиген, который титруют методом «шахматной доски», употребляя двукратно возрастающие разведения (от неразведенного) антигена и двукратно возрастаю­ щие (от 1:8 ) разведения стандартной сыворотки. Оптимальным принято считать наиболее высокое разведение антигена, которое вызывает полное связыва­ ние комплемента при наивысшем разведении сыворотки. Количество этого разведения антигена составляет его 1 единицу. В РСК используют 2 единицы антигена, т. е. если, например, оптимальное связывание комплемента наблюдалось при разведении антигена 1:8, то в основ­ ной РСК его используют в разведении 1:4. Титрование комплемента независимо от того, исполь­ зуется в качестве него сыворотка морской свинки или консервированный и даже лиофилизированный препа­ рат, производится каждый раз в день постановки основ­ ной РСК. С этой целью к возрастающим в арифметиче­ ской прогрессии разведениям комплемента (1:30, 1:40 и т. д., например до 1:140) добавляют равный объем сенсибилизированных эритроцитов и инкубируют при 37 °С в течение 30 мин, после чего учитывают результат. Количество наивысшего разведения комплемента, вызы­ Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека