NED359428NED

висимости от того, каковы оптимальные условия нейтра­ лизации данного вируса исследуемыми антителами. После этого содержимым пробирок заражают чувст­ вительные к данному вирусу биологические объекты (по меньшей мере по 3 для каждого разведения вируса с сывороткой) и наблюдают за ними в соответствующие промежутки времени с целью определения EDso. Нейтрализующую активность сыворотки, обозначае­ мую как индекс серонейтрализации, высчитывают деле­ нием титра ED 50 смеси вируса с исследуемой сыворот­ кой на титр ED 50 того же вируса с нормальной сыворот­ кой. Если, например, ED S0 вируса с исследуемой сыво­ роткой 10 ~3'5, а с нормальной сывороткой— 10 ~7>5, то индекс нейтрализации составит (10-3-5 : lO-7-5) 104. Эта величина означает, что исследуемая сыворотка нейтра­ лизовала 104(10 000 ) доз вируса, снизив его инфекцион­ ный титр на 4 lg. П остан овка р еакц и и при постоянной д о зе ви руса. Этот способ в лабораторной практике применяется чаще по методическим соображениям (более удобен и требует меньшего количества сыворотки), к тому же условия нейтрализации вируса в этом случае лучше, так как применяются менее концентрированные его взвеси. Чаще всего используют двукратно возрастающие разведения сывороток и одну постоянную дозу стандартного виру­ са — 100 или 1000 ED50. Необходимую для реакции величину дозы вируса высчитывают следующим образом. Например, в реакции решили использовать 1000 LDso/мл. Титр вируса при предварительном его титровании равен 1 0 - * 1 Л ) бо / м л , т. е. 1 мл этого разведения вируса содержит минималь­ ную его дозу, вызывающую гибель 50% животных. Эту дозу принимают за 1 LD 50 . 1 мл разведения 10-7 содер­ жит соответственно IOLD 50 , разведения 10-6— 100LD50, а разведения 10-5 —IOOOLD 50 , т. е. то количество вируса, которое нужно для реакции. Именно это последнее раз- ведение вируса следует использовать в указанном при­ мере. Второй пример. Вирус имеет при титровании на тка­ невой культуре титр 10~7-5 ТЦД50, а в реакции нейтра­ лизации решено использовать 100 ТЦД 50 . В этом случае используют разведение вируса 10-5’8. Последнее приго­ товляют из более низкого ( 10 -5) добавлением к 1 мл взвеси вируса 2,2 мл буферного раствора (например, 198 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека