NED359428NED

При постановке реакции необходимы дополнитель­ ные контрольные исследования, особенно если она про­ водится на культурах клеток. Эти дополнительные ис­ следования имеют целью исключить неспецифическое действие отдельных компонентов реакции на культуры клеток или другие биологические объекты, используе­ мые в опытах. Важное значение имеет использование специфичес­ ких контрольных сывороток, реагирующих положитель­ но в реакции. Использование неочищенного вируссодержащего ма­ териала для иммунизации животных с целью получения активных диагностических сывороток может привести к образованию антител не только против вирусов, но и против тканевых антигенов. Это может затруднить оцен­ ку серологических и серобиологических реакций, так как, с одной стороны, сыворотка реагирует с вирусом, а с другой — ее противотканевые антитела, действуя повреждающе на тканевые культуры, могут также кос­ венно влиять на репродукцию вирусов. П о стан овка реакц и и при постоянной дозе сыворотки. Приготовляют 3 ряда 10-кратно возрастающих разведе­ ний известного вируса (к которому ищут антитела) в объеме 1 мл или других объемах в зависимости от пред­ полагаемого их использования для инфицирования. З а ­ тем в первый ряд пробирок добавляют по 1 мл исследу­ емой сыворотки, во второй ряд в таком же объеме — контрольную нормальную сыворотку, а в третий — фи­ зиологический раствор. Штатив встряхивают, а содер­ жимое пробирок стерильно переносят в чистые пробир­ ки. Встряхиванием не следует пренебрегать, в против­ ном случае вирус, находящийся на стенке пробирок, не будет нейтрализован сывороткой, а его инокуляция в куриные эмбрионы или тканевые культуры может иска­ зить результаты реакции. Процедуры переноса смеси вируса с сывороткой в чистые стерильные пробирки можно избежать, если ввести вирус прямо на дно про­ бирок, не загрязняя им стенки, или проводить инкубацию смеси в пробирках с закручивающимися пробками, что делает возможным тщательное смешивание вируса с сывороткой. Ряды разведений, содержащие смесь вируса с сыво­ роткой, оставляют на определенное время при комнат­ ной температуре или при температуре 37е или 4°С в за­ 197 Элек рон ая Научная Сельск Х зяйственная Библиотека