NED359428NED

теряют способность элюироваться с эритроцитами. Та­ кие вирусы называют индикаторными, так как с их по­ мощью в сыворотках и других исследуемых жидкостях можно обнаружить ингибиторы, которые не расщепля­ ются индикаторными вирусами после термической обра­ ботки. Поэтому разница в титре гемагглютинации слу­ жит мерой количества ингибиторов. Явления гемагглютинации и элюции позволяют чрез­ вычайно просто очистить взвеси вирусов, обладающих этими свойствами. Например, если добавить эритроци­ ты в аллантоисную жидкость эмбрионов, содержащих) вирус ньюкаслской болезни (или гриппа), до получения конечной концентрации 5% и поместить в температуру 4°С на один час, то произойдет адсорбция вируса на эритроцитах и их агглютинация. После удаления над- осадочной жидкости (и, следовательно, всех посторон­ них веществ) и промывания осадка холодным раство­ ром PBS добавляют новую порцию PBS. Взвесь поме­ щают на водяную баню с температурой 37°С. В этой фазе происходит высвобождение вируса в результате элюции. При использовании для элюции меньшего по срав­ нению с начальным количества жидкости происходит еще и концентрация вируса, что иногда необходимо, например, для постановки реакций клеточной резистент­ ности (см. стр. 217). Реакция количественной гемадсорбции (по Финтеру) После удаления питательной среды из культуры кле­ ток на нее наносят определенное количество (например, в пробирки по 2 мл) 0,4%-ной взвеси эритроцитов на 10 мин, после чего взвесь сливают.и культуру промы­ вают холодным раствором PBS. Затем в пробирки добавляют по 2 мл дистиллирован­ ной воды для гемолиза эритроцитов, адсорбированных на клетках культуры. Жидкость отсасывают и при помощи фотоколори­ метрии определяют в ней концентрацию гемоглобина. Полученные результаты достоверны только при срав­ нении одинаковых поверхностей клеточных слоев; более пригодна эта методика при исследованиях культур в чашках, а не в пробирках. 12 3. Лярски Электронная Научная Сель коХозяйственная Библиотека