NED359428NED

шек), если жидкость попадает между агаром и слоем клеток. Такие же последствия может иметь и нанесение второго слоя агара с красителем. При отборе бляшек всегда следует учитывать воз­ можность того, что, кроме частиц вируса, вызывающего образование бляшек, можно захватить (и этого нельзя исключить) также нецитопатогенные, но способные к репродукции частицы вируса. Подсчет частиц вируса в суспензионных клеточных культурах Этот метод разработан Сандерсом [159]. Для его вы­ полнения необходимо соблюдение следующих условий;. — взвесь должна состоять из одиночных клеток (а не конгломератов), способных пережить период наблю­ дения; — клетки должны быстро адсорбировать вирус и спо­ собствовать его репродукции; — необходимо владеть абсолютно надежным методом, позволяющим отличить инфицированные и неинфици- рованные клетки. Исследование проводится сразу после завершения одного цикла репродукции вируса. Сандерс использовал с этой целью водный раствор эозина, который окрашивает только мертвые и по­ врежденные клетки. Сравнивая методику окрашивания зараженных взве­ сей клеток и метод бляшек, Сандерс указывает на раз­ личия в действии частиц вируса, вызывающих эти два разных феномена. Бляшкообразующая частица вируса — это вирус, об­ ладающий способностью инфицировать клетку, репроду­ цироваться в ней и заражать соседние клетки (в резуль­ тате возникает различимая бляшка). В то же время ме­ тод окрашивания инфицированных суспензионных куль­ тур позволяет определить количество вирусных частиц, убивающих клетку (англ. — CellKilling Particles, или СКР), т. е. частиц, способных адсорбироваться и убивать клетку в течение времени, необходимого для завершения одного цикла репродукции вируса без его высвобожде­ ния. Отсюда можно предположить, что эти частицы яв­ ляются деградированной формой бляшкообразующей частицы, а такж е то, что инфицирование клеток боль­ шими дозами вируса может давать потомство, в кото­ 169 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека