NED359428NED

кетоД очень прост, но он, скорее больше подходит для титрования вируса, ориентировочный титр которого уже известен. Д ля подсчета цитопатогенных единиц Чанг и др. [30] предложили следующую формулу: н в ч , ' е = 7 Т Т - где А — общее количество пробирочных клеточных куль­ тур, в которых обнаружен ЦПЭ; а — общий объем ма­ териала, использованного для инфицирования культу­ ры; в — объем материала, после инокуляции которого не было обнаружено ЦПЭ. Получить значения НВЧЦЕ без вычисления позво­ ляет таблица Чанга и др. (Приложение V III). НВЧЦЕ можно определить даже на основании ре­ зультатов инфицирования небольшого числа культур, например 15 пробирок. Пользоваться таблицами легче, если применять четырехкратные разведения вируса, ко­ торыми заражаются три группы пробирочных культур, по 5 каждая. Объясним это на примере. Разведением вируса 10~4 ( 1: 10 000) было инфицировано 5 культур по 1 мл, 5 — по 0,25 мл и 5— по 0,0625 мл (четырехкрат­ ное серийное разведение). При учете результатов реакции ЦПЭ наблюдался во всех пяти пробирках первой, в двух — второй и в трех — третьей группы. Из таблицы Чанга видно, что при таком распределении результатов НВЧЦЕ состав­ ляет 4,5 в 1 мл взвеси, использованной для заражения культур. Так как взвесь была разведена в 10 000 раз, то в исследуемом исходном материале было таких единиц 45 000, т. е. 104-07. Другой пример. Если для заражения культур коли­ чество вируса было в 10 раз меньше—0,1; 0,025 и 0,00625 мл, а ЦПЭ обнаружен соответственно в 4, 2 и 1-й пробирке, то число 1,91, найденное в таблице Чанга, надо умножить на 10 (=19,1), а затем на величину раз­ ведения. Другие количественные исследования с использованием метода бляшек В вирусологических исследованиях иногда возникает необходимость определения двух параметров — количе­ ства инфекционных центров и эффективности инфици­ рования (англ. — efficiency of plating). 167 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека