NED359428NED

вается в среднем б бляшек, то в 1 мл их должно быть в 5 раз больше, т. е. 30. Умножив эту величину на 10 000 (разведение вируса, вызвавшее образование указанного количества бляшек), получим 300000, т. е. число бляш­ кообразующих единиц (БОЕ), содержащихся в 1 мл неразведенного вируса. Так как оперировать с много­ значными числами неудобно, лучше представить полу­ ченную величину (на основании логарифмических таб­ лиц) в виде 10 5*48 БОЕ/мл. Лоренц и Зот (108] на основании собственных экспе­ риментов пришли к выводу, что найденные величины вследствие слияния бляшек часто оказываются занижен­ ными и рекомендуют поэтому проводить вычисления на основе данных, полученных на культурах с малым коли­ чеством БОЕ, т. е. зараженных более высокими разведе­ ниями вируса. Определение числа БОЕ в клеточных агаровых культурах Этот метод применяют обычно при использовании клеток, медленно растущих in vitro. Однако его можно применять при оперировании с любыми клетками, так как он имеет ряд преимуществ: 1 ) позволяет избежать контакта клеток со стеклом, благодаря чему уменьша­ ется возможность токсического эффекта; 2 ) позволяет использовать смешанные популяции клеток, которые да­ ют мутные или прозрачные бляшки, содержащие мутан­ тов, отличающихся друг от друга по своей видовой чув­ ствительности. При употреблении однородной популяции образовавшиеся бляшки не отличаются по своим разме­ рам и морфологии в такой степени, как это наблюдает­ ся в однослойных культурах клеток. Недостатком мето­ да является необходимость употребления большего (по крайней мере в 2 —3 раза) количества клеток. Л о с т а н о в к а о п ы т а (цит. по Хоскинсу [78]) 1. Приготовить взвесь клеток в питательной среде, со­ держащую 6,3X10® клеток в 1 мл. 2. В соответствующее количество чашек Петри диамет­ ром 6 см разлить по 10 мл теплого (44°С) питатель­ ного агара (двукратно концентрированный раствор Эрла и 3%-ный агар в равных частях, а также 2% телячьей сыворотки) и оставить до застывания. Этот слой считается основанием. 164 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека