NED359428NED
Рис. 15. Бляшки в однослой ных культурах клеток (ок руглые, практически одина кового размера). Рис. 16. Бляшки в однослой ных культурах клеток (зна чительные различия в раз мерах). учитывают результаты. Недостатком этого способа ■окраски культур является то, что учет результатов нель зя проводить в последующие дни. Вместо первого слоя агара можно использовать 1%-ную метилцеллюлозу. По истечении времени, необ ходимого для бляшкообразования, для их выявления в культуру добавляют нейтральный красный, как указы валось выше. Д ля получения фотографий, документации результатов и других целей препараты можно зафикси ровать. Для этого в чашки наливают около 5 мл PBS, ставят в термостат на 30—60 мин, затем сливают жид кость, а кружок агара осторожно отделяют от краев чашки и удаляют. Чашки ставят в термостат для высу шивания; под воздействием С 0 2 цвет клеток становится более интенсивно красным, на фоне которого хорошо выделяются прозрачные бляшки. Высушенные препара ты, если их держать в темном месте, сохраняют свой цвет в течение нескольких лет. Подсчет количества бляшкообразующих единиц Способ подсчета очень простой, однако для большей точности рекомендуется учитывать среднее количество бляшек, полученных на нескольких (по крайней мере двух) чашках. П р и м е р п о д с ч е т а . Если на чашках, зараженных 0,2 мл вируса в разведении 1:10 000 ( 10 -4), обнаружи U* 163 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека
RkJQdWJsaXNoZXIy