NED359428NED

при превышении эффективной дозы наступает реакция, характерная для заражения данным возбудителем. Та­ ким образом, метод позволяет определить инфекцион­ ный титр вируса, или его минимальную эффективную дозу. Это всего лишь статистическая доза, не имеющая физического тождества. Применяемое ранее обозначение минимальной ле­ тальной дозы DLM (do sis leta lis m in im a ), вызываю­ щей гибель 100% животных, оказалось неточным в связи с индивидуальными различиями в чувствительно­ сти к инфекции. Поэтому в настоящее время определя­ ют дозу возбудителя, вызывающую гибель 50% инфи­ цированных особей, так называемую LD5o. По анало­ гии с этим ID 50 , или инфекционная доза 50%, означа­ ет количество вируса, способное инфицировать 50% зараженных животных, Ц П Д5о — цитопатическую дозу, вызывающую гибель зараженной культуры клеток в 50% пробирок, ПД50 — дозу, вызывающую параличи у 50% зараженных животных и т. д. С целью определения ED 50 клеточные культуры, ку­ риные зародыши или животных заражают последова­ тельными разведениями вирусного материала, исполь­ зуя на каждое разведение не менее трех биологических объектов. Из практических соображений- (возможность использования одного шприца, пипетки) введение ис­ следуемого материала начинают от наиболее высоких разведений и кончают наиболее концентрированными (способы инфицирования описаны в предыдущей главе). Монослойные пробирочные культуры клеток инфици­ руют, вводя по 0,15 мл соответствующего разведения вируса после смены питательной ростовой среды на поддерживающую. Нужно помнить, что учитывается раз- ведение вируса, введенного в клеточную культуру, а не его конечное разведение. Например, инфицируя куль­ туру, содержащую 1,5 мл жидкости, дозой вируса 0,15 мл в разведении 1:10, достигается его конечное разведение 1:100; однако в записи указывается, что культура была инфицирована материалом в разведе­ нии 1 : 10. Аналогично этому при внутривенном заражении жи­ вотных вирусом не делается поправка на его разведе­ ние в крови и при заражении куриных эмбрионов в ал­ лантоисную полость не учитывается конечное разведе­ ние вируса в аллантоисной жидкости. 146 Электронная Научн я СельскоХозяйственная Библи тека