NED359428NED

Живания. Положительное действие добавок защитных веществ значительно менее выражено при заморажи­ вании взвесей органов и тканей животных (клеточные экстракты сами обладают защитными свойствами), но более заметно при замораживании таких взвесей, как аллантоисная жидкость или жидкость, полученная из зараженных культур клеток. Если же, однако, в пита­ тельной среде содержалось 2—10% сыворотки или гид­ ролизат лактальбумина, то ее можно заморозить без добавления других веществ. Хорошее защитное действие при замораживании вирусов и хранении их в таком состоянии оказывает добавка одного из следующих компонентов: 10—30% инактивированной сыворотки (опасности, связанные с ее применением, описаны выше), 0,5—1,5% желатина, 20—50% обезжиренного молока, 0,1—0,5% метилцел- люлозы, 1—5% пептона, 5—20% гидролизата животно­ го белка, 10% DMSO. Последний в частности хорошо защищает оболочечные вирусы, особенно герпесвирусы. Эти вирусы, как установлено, при температуре хра­ нения — 20 °С погибают значительно быстрее, чем при 4°С (наибольшие потери отмечаются во время за­ мораживания). DMSO в конечной концентрации 10% ока­ зывает эффективное защитное действие по отношению к оболочечным вирусам, таким, как вирусы герпеса, ко­ ри, везикулярного стоматита животных и вируса Синд- бис даже при четырехкратном замораживании и оттаи­ вании; в контрольных пробах без добавления DMSO вирусы инактивировались. Вирусы, чувствительные к низким значениям pH, следует замораживать в жидкостях, не содержащих однозамещенных фосфатов (NaH2P 0 4 или KH2P 0 4), которые обладают кислой реакцией и имеют более низкую точку замораживания, чем двузамещенные фос­ фаты (Na2H P 0 4 или К гН Р04) с щелочной реакцией. При температурах от —20 до —30 °С можно хра­ нить длительное время без значительного снижения титра все безоболочечные вирусы, а также поксвирусы. В то же время вирусы, имеющие липидную оболочку, лучше сохраняются при температурах от —60 до —80 °С (особенно это касается герпес-, тога-, корона- и миксо- вирусов). Хранение при температурах от —20 до —30 °С вызывает снижение их титра, несмотря на добавление консервирующих и защитных веществ. 140 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека