NED359428NED

1) раствор А — 0,1 М лимонная кислота (21,008 г/л); 2) раствор Б — 0,2 М Na2HP04-2H20 по Соренсену (35,62 г/л). Требуемую величину pH получают путем смешива­ ния этих растворов в следующих соотношениях: для pH 3,0 15,89 мл раствора А и 4,11 мл раствора Б » pH 3,4 14,30 мл » » 5,70 мл » » » pH4,0 12,29 мл » pH6 ,0 7,37 мл » pH7,8 2,61 мл » pH8,0 0,55 мл » 7,71 мл » » » 12,63 мл » » » 17,39 мл » » » 19,49 мл » » П о с т а н о в к а о п ы т а (по Майру и др.) 1. Вируссодержащий материал диализируют против 100-кратного объема буферного раствора Мак-Ил ь- вена с pH 7 в течение 24 ч при температуре 4°С. 2. Диализат смешать в соотношении 1: 10 до 1 : 100 с буферным раствором с разными pH и поместить в водяную баню при температуре 37°С. После добав­ ления буферных растворов, следует проверить в про­ бирках pH и при необходимости довести его до же­ лаемого. 3. Пробирки вынимать из бани через 30, 60, 120 и 180 мин, содержимое их сразу развести и инфициро­ вать клеточные культуры для определения титра вируса. В таких условиях опыта вирусы, чувствительные к pH 3,0, теряют свою инфекционность. Рекомендуется проводить исследование с использованием в качестве контроля энтеровирус как резистентный и риновирус как чувствительный к pH 3,0. Определение чувствительности к действию температуры Вирусы характеризуются разной чувствительностью к действию температуры. Особенно отчетливо эти от­ личия выявляются в зоне температур от 50 °С до 60 °С. Описанная ниже проба (по Ровозо и Берку) проводится при температуре 56 °С, однако некоторые вирусы явля­ ются резистентными и к более высокой температуре, а некоторые чувствительны к более низкой. П о с т а н о в к а о п ы т а 1. Влить в маленькую пробирку неразведенную взвесь исследуемого вируса и поместить ее в водяную ба­ 135 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека