NED359428NED

3. Осторожно отсасывают жидкость и клетки слегка промывают второй раз большим количеством поддер­ живающей среды. 4. Добавляют по 0,5 мл 0,4%-ных индикаторных эритро­ цитов, способных связываться с глобулинами морской свинки (способ приготовления описан ниже), и ос­ тавляют при комнатной температуре на 30 мин, пос­ ле чего учитывают результат под небольшим увели­ чением микроскопа. П р и г о т о в л е н и е и н д и к а т о р н ы х э р и ­ т р о ц и т о в 2%-ную взвесь промытых эритроцитов барана сме­ шивают с равным количеством разведения 1:300 (-0,5 агглютинирующей дозы) сыворотки морской свинки против эритроцитов барана и оставляют на 1 ч при комнатной температуре, после чего центрифугируют, промывают дважды в PBS и опять приготовляют 2%- ную взвесь. Затем эту взвесь смешивают с равным количеством разведения 1 :30 сыворотки кролика, им­ мунизированного гамма-глобулином морской свинки, оставляют при комнатной температуре на 2 ч, центри­ фугируют, промывают один раз в PBS и ресуспендиру- ют для получения 2%-ной взвеси, которая и представ­ ляет собой индикаторные эритроциты. Метод, предложенный Эспмарком, оказался при­ годным для обнаружения вирусов осповакцнны, кори, чумы собак и герпеса. Реакция нейтрализации торможения гемагглютина- ции разработана для диагностики чумы крупного рога­ того скота (подробное описание см. на стр. 301). Реакция торможения гемагглютинации (РТГА ) Этот метод позволяет быстро и точно идентифи­ цировать вирусы, обладающие гемагглютинирующими свойствами. Принцип реакции очень прост. Если извест­ ную диагностическую сыворотку, т. е. сыворотку, содер­ жащую антитела против определенного вируса, напри­ мер «А», смешать с исследуемым неизвестным выделен­ ным возбудителем, в результате чего исчезнет гемагглю- тинирующая активность вируса, то это будет означать, что исследуемый вирус есть вирус «А». Отсутствие тор­ можения свидетельствует о том, что в пробе находится другой гемагглютинирующий вирус. Исследуя по очере­ 118 Электронная Научная СельскоХозяйств нная Библиотека