NED359428NED

агара. Технические детали этого метода описаны в главе V. Положительный результат реакции гемагглютинации с культуральной средой является доказательством зара­ жения культуры одним из гемагглютинирующих виру­ сов. В этом случае необходима дальнейшая идентифи­ кация. Реакция гемадсорбции, предложенная Фогелем и Щелоковым [193], позволяет еще раньше выявить за­ ражение культуры. Выполняется она следующим обра­ зом. Питательную среду сливают и культуру дважды промывают раствором PBS. Затем вводят 0,2 мл 0,4%- ной взвеси эритроцитов курицы или морской свинки (а также других видов животных — в зависимости от вида исследуемого вируса) и культуры ставят на 10 мин в горизонтальное положение, чтобы Езвесь эритроцитов прикрывала клетки. После этого культуру просматри­ вают под микроскопом. На положительную реакцию указывает очень характерное явление прилипания эри­ троцитов к клеточному слою. В качестве контроля ис­ пользуют незараженные культуры. Для идентификации вируса в данном случае используется реакция торможе­ ния гемадсорбции. Присутствие вируса можно также подтвердить с по­ мощью реакции иммунофлюоресценции (см. стр. 31 и И З). Д ля этой цели используют культуры на покровных стеклах, как и при описанных выше микроскопических исследованиях цитоп этического эффекта. Взвешенную культуру клеток заражают путем доба­ вления к ней взвеси вируса, либо клетки после центри­ фугирования помещают в свежую вируссодержащую питательную среду. Д ля определения повреждения кле­ ток под действием вируса очень удобны описанные вы­ ше методы окраски, позволяющие отличить живые клетки от мертвых. Л и т е р а т у р а : [4]; [21]; [23]; [24]; [35]; [38]; [45]; [55 [59]; [67]; [68J; [78]; [79]; [82]; [104]; [105]; [114]; [117]; [118 [126]; [127]; [132]; ]134]; [143]; [154]; [168]; [170]; [171]; 173 [174]; [181]; [183]; [189]; [192]; [193]; [196]; [213]; [217]; [218 Электронная Научная СельскоХозяйственн я Б блиотека