NED359428NED

В случаях заражения культуры известным вирусом по­ сле удаления ростовой среды (которую можно слегка стряхнуть) добавляют поддерживающую среду и 0,15 мл вирусной взвеси. Д ля упрощения манипуляции можно вводить вирус сразу в поддерживающей среде (см. стр. 146). Заражение системы двойных или тройных культур в одном сосуде (стр. 99) не отличается от метода зара­ жения единичных культур. Введение вируса в сосуд приводит к одновременному заражению растущих там культур. Наблюдение и определение изменений облегча­ ет распознавание вируса на основе различной чувстви­ тельности к нему разных видов клеток (host range). Майр и др. [118] рекомендуют при .работе с некото­ рыми вирусами, например поксвирусами и парвовиру- сами, заражать культуры клеток одновременно с их посевом. Это облегчает работу и позволяет сэкономить время, однако такой ход работы возможен только при использовании быстро растущих клеток и сравнительно медленно размножающихся вирусов. Наблюдения за изменениями клеток Зараженные культуры ежедневно просматривают под малыми увеличениями микроскопа для выявления цито- патического эффекта вируса. Наблюдение облегчается при использовании соответствующей подставки под про­ бирки. При проведении более тщательных морфологичес­ ких исследований препараты красят и просматривают под большим увеличением. Д ля этого необходимы куль­ туры, в которые в процессе их приготовления вкладывают тонкие покровные стекла. Эти стекла, покрытые слоем клеток и зараженные вирусом, вынимают пинцетом и окрашивают. По вызываемым изменениям вирусы делят на следу­ ющие группы: — цитопатогенные (повреждающие клетки); — вызывающие пролиферацию клеток; — не вызывающие при размножении видимых морфо­ логических изменений. Существует несколько типов изменений клеток. Большинство вирусов вызывает изменения, протекаю­ щие в две фазы. В первой фазе клетки округляются, их контуры становятся более четкими, а затем устанавли­ 109 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека