NED359428NED

живающую, обеспечивающую лишь их выживание. В некоторых случаях эта среда отличается от предше­ ствующей только меньшим содержанием в ней сыворот­ ки, эмбрионального экстракта или гидролизата лакта- льбумина. Используются также синтетические или по- лусинтетические среды сложного состава. Процедура заражения Ростовую питательную среду сливают, а в пробирки с культурой доливают пипеткой около 1,5 мл PBS. Лег­ ким наклоном пробирки промывают клеточный слой и раствор выливают. Эта процедура повторяется еще 2— 3 раза. Таким путем преследуется цель удаления анти­ тел и ингибиторов, присутствующих в сыворотке, кото­ рая входит в состав ростовой среды (известно, что да­ же следы сыворотки отчетливо подавляют размножение вирусов парагриппа). В рутинной работе промывка культуры раствором PBS часто опускается. Дальнейший ход исследований зависит от целей заражения культуры. Если речь идет о выделении ви­ руса из материала, присланного для исследования, ис­ пользуется техника адсорбционного заражения, основан­ ная на внесении в культуру клеток довольно большого количества — около 0,5 мл — исследуемой взвеси непо­ средственно на слой культуры с дальнейшим сохране­ нием при комнатной температуре или при температуре 37 °С в течение 1—4 ч. Этим преследуется цель предо­ ставить вирусу, которого в присланном материале мо­ жет быть очень мало, возможность максимально адсор­ бироваться на клетках культуры. Затем исследуемую взвесь отсасывают пипеткой и культуру несколько раз промывают раствором PBS. Это особенно важно в тех случаях, когда исследуются взвеси экскретов, в част­ ности кал, моча и другие материалы, обладающие ток­ сическим действием на культуры. Далее в пробирки с культурой добавляют по 1,5 мл поддерживающей питательной среды (в сосуды больше­ го объема соответственно больше, например в матрацы Ру емкостью 1 л — 80 мл, в матрацы Л егру— 15 мл), после чего их плотно закрывают резиновыми пробками и переносят в термостат с температурой 35—37 °С, в зависимости от вида вируса (для риновирусов 33°С). 108 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека