NED359428NED
7. Р есуспенди ровать осадок клеток в соотношении 1:200 в питательной среде следую щ его состава: раствор Хенкса ............................................................ 88% телячья сы воротка...........................................................2% 5%-ный раствор гидролизата лактальбумина . 10% антибиотики в количествах, указанных выше 8. Взвесь клеток разлить по пробиркам (100X12 мм) по 2 мл и закрыть резиновыми пробками. Через 48 ч инкубации в термостате получается сплошной монослой клеток. Ткань почек, хранившуюся в течение 7 дней при 4°С, тоже можно использовать для приготовления культуры, но она дает, однако, несколько худший рост. Получение культуры клеток некоторых видов жи вотных нередко связано с большими трудностями из-за присутствия в них сиротских вирусов. Типичным приме ром является наличие SV40 в почках большинства обезьян, аденовирусов в почках свиней, синцитиальных («пенистых») вирусов у кошек. Известно, что 90% ко шек разного возраста (даже 16% плодов) содержат в своих тканях синцитиальные вирусы. Размножение клеток лабораторных линий Описанные выше способы приготовления культур относятся к первичным клеточным культурам, называе мым также примокультурами. При этом клетки вы свобождаются каждый раз заново из тканей жи вотных. При помощи последовательных пассажей, переноса первичных клеток и поддержания их роста можно полу чить клеточные линии. Если они при этом приобретают способность к неограниченному пассированию, их счита ют стабильными (перевиваемыми) клеточными, линия ми (см. стр. 72). Этим способом было получено боль шое количество штаммов перевиваемых клеточных ли ний как из нормальных тканей человека и животных, так и из опухолевых тканей. В качестве примера можно указать на штамм HeLa (клетки рака шейки матки), КВ (клетки рака носа и гортани), FL (клетки челове ческого амниона), Детройт-6 (клетки костного мозга че ловека), L (фибробласты из подкожной ткани мыши), RbK J и RbK 13 (почки кролика), ВНК21 (почки ново- 102 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека
RkJQdWJsaXNoZXIy