NED359428NED

тивоположных стенках, или даже в смеси культур двух видов клеток. Клетки прикрепляются к стеклу, начинают делиться и покрывают его поверхность через 4—6 дней, иногда лишь через 10 дней. Если клетки растут медленно, не­ обходимо на 4-й день заменить питательную среду но­ вой. Бодьян [21] предложил упрощенный способ трипси- низации почечной ткани. Первая трипсинизация прово­ дится в течение 6 ч при 4°С или 2 ч при комнатной тем­ пературе (можно также с успехом трипсинизировать при 37°С на водяной бане в течение 20 мин), а полу­ ченная взвесь выбрасывается. Затем повторно добавля­ ют раствор трипсина и обработка длится всю ночь при 4 °С (в случае использования собачьей почки трипсини- зацию необходимо сократить до 10 час). Полученную клеточную взвесь используют для получения культуры, а в остатки ткани можно опять долить раствор трипсина и на следующий день снова получить взвесь жизнеспо­ собных клеток. Наблюдение за ростом в чашках Петри осуществля­ ется с помощью инвертированного микроскопа. Однослойные культуры клеток куриных эмбрионов В принципе для этого необходимо иметь то же обо­ рудование и растворы, которые используются для при­ готовления культуры клеток из почек свиньи, с той лишь разницей, что вместо раствора Хенкса используется ра­ створ Эрла. Он обладает большей буферной емкостью, что очень важно для получения культуры эмбриональ­ ных клеток, характеризующихся активным метаболиз­ мом. Приготовление культуры осуществляется следующим образом. 1. Оплодотворенные яйца на 10—11-й день инкубации обмыть водой с мылом и продезинфицировать скор­ лупу 70%-ным спиртом. 2. Эмбрионы вынуть на лоток, отрезать голову, промыть в PBS, тушки мелко нарезать ножницами и повторно промыть в PBS*. * Для получения более однородных клеток следует удалить со­ держимое брюшной полости эмбриона. — Прим, перев. 100 Электронная Научная СельскоХозяйстве ная Библиотека