NED354493NED

Степень устойчивости подсолнечника к заразихе определяется на ос­ новании двух показателей: 1) процент пораженных растений от общего числа учетных; 2) степень поражения - среднее количество цветоносцев заразихи на одно пораженное растение. 12.7.1. Лабораторная оценка фунгицидов Проводится на чистой культуре возбудителя, выращенного на жидкой среде Чапека. Состав питательной среды Чапека: сахароза - 30г натрий азотнокислый (N aN 03) - 2 г калий фосфорнокислый однозамещенный (КН2Р 0 4) - 1 г магний сернокислый (M gS04-7H20 ) - 0,5 г калий хлористый (КС1) - 0,5 г железо сернокислое (F eS 04- 7Н20) - 0,01 г вода дистиллированная - 1 л После растворения всех компонентов среду разливают в конические колбы емкостью 250 мл по 100 мл в каждую. Колбы закрывают ватными пробками, сверху покрывают бумагой и завязывают. Стерилизация проводит­ ся под давлением 0,5 атм. (112 °С) в течение 30 мин. После стерилизации в питательную среду вносят мицелий гриба, зара­ нее выращенный на стерильных семянках подсолнечника или зерновках овса. Перед стерилизацией семянки подсолнечника на сутки замачивают водой, затем наполняют конические колбы емкостью 0,5 л, 0,7 или 1 л примерно на половину и стерилизуют. Питательную среду из овса готовят несколько ина­ че. В конические колбы засыпают овес из расчета 100 г на колбу емкостью 0,5 л и 100 мл воды. Стерилизуют семянки подсолнечника или зерновки овса в автоклаве текучим паром дважды по 1 часу с разрывом в сутки. Выращивается культура в термостате при температуре 22-24 °С. Спу­ стя 3-4 дня колбы тщательно встряхивают для равномерного распределения наросшего мицелия гриба по питательному субстрату. Обычно на 10-12-й день культура готова. В каждую колбу с жидкой питательной средой Чапека вносят по одной семянке подсолнечника или зерновке овса с явно видимым мицелием исследуемого возбудителя. В течение 3-5 суток после внесения гриба среду выдерживают в термостате при температуре 22-24 °С. За это вре­ мя вокруг места внесения заметно нарастание мицелия. Колбы, в которые по­ пали другие виды грибов или мицелий не дал прироста, выбраковываются. На 4-5-е сутки в каждую колбу вносят препарат из расчета 10-20 мкг. Пред­ варительно препарат растворяется в 1 мл стерилизованной воды или в рас­ творителе диметилсульфооксида (ДМСО). Также можно использовать в качестве растворителей этанол или ацетон. Эти вещества при внесении в пи­ тательную среду в указанном количестве (1 мл) на рост возбудителя не влия- яют. Для оценки каждого препарата необходимо брать не менее 3-х колб. В качестве эталона используют фунгицид, рекомендованный для защиты под­ солнечника от испытываемого патогена, по 10 мкг на каждую колбу. В кон­ трольный вариант препарат не вносят. Затем колбы снова помещают в 190