NED354493NED

3. Из жидких сред в жидкие: а) выдувание из пипетки набранной жидкости в жидкую среду; б) перенос спор из жидкой среды в жидкую. 4. Из жидких сред в твёрдые: а) выдувание из пипетки набранной жидкости в твёрдую среду и сливание её оттуда; б) выливание из пробирки разболтанных в воде спор на твёрдую среду и сливание воды обратно; в) перенос спор на кончике иглы из жидкой среды на твёрдую. 12.6. ВЫДЕЛЕНИЕ ГРИБОВ ИЗ РАСТЕНИЙ Семена. Важность экспертизы семян, являющихся во многих случаях передатчиками инфекции, вполне ясна. Но, чтобы произвести правильную оценку болезней семян, нельзя ограничиться только экспертизой семян, про­ изводимой центрифугированием и микроскопическим анализом, а надо также провести анализ их в культурах на питательной среде. Это делается с целью вызвать плодоношение у бесплодной стадии грибницы, по которой нельзя вести определение. Для экспертизы из мелких проб составляют общую пробу, которую тщательно перемешивают, затем из неё берут среднюю пробу в количестве 200 штук семян. Из этой средней пробы 25 штук размещают с помощью сте­ рилизуемого перед взятием каждого семени пинцета на уже застывший пита­ тельный агар в чашки Петри. Также поступают и с остальными семенами средней пробы. При этом, если целью изучения является обнаружение по­ верхностных грибов, семена не подвергаются дезинфекции; если же целью является изучение грибов, находящихся внутри семян, то перед раскладыва­ нием семян, которое также производится стерильным пинцетом, их дезинфи­ цируют или в марганцево-кислом калии, или на одну минуту погружают в чистый спирт (95 %), потом быстро промывают в стерильной воде и выкла­ дывают на стерилизованную фильтровальную бумагу для высушивания. По­ сле этого высохшие семена раскладываются в чашки Петри, которые ставятся в термостат с температурой 22-25 °С. Наблюдение начинается с 3-4-го дня, когда около семянки начинает развиваться грибница, которая по мере роста стерильной платиновой иглой переносится в пробирки с косым агаром, на котором выращивается и определяется. Если культура не особенно чиста и определение затруднено, она очищается методом разливки. Иногда для более легкого обнаружения скрытой грибницы семена, предварительно продезинфицированные, разрезаются скальпелем на две ча­ сти и потом проращиваются. Проращивание склероциев, иногда сопровождающих семена, произ­ водится следующим образом: склероции дезинфицируют в 95 %-ном спирте в течение 10 минут и затем стерильной бритвой из них делают тонкие срезы, которые помещают в чашки Петри или в пробирки с питательным агаром. Хорошие результаты даёт проращивание семян на стерилизованном песке, главным образом тех из них, кожура которых уже сама по себе являет­ ся питательной средой. 185