NED354493NED

12.5. ПОСЕВ КУЛЬТУР И НАБЛЮДЕНИЕ ЗА РОСТОМ ГРИБОВ Посев грибов на питательные среды проводим с помощью микробио­ логической петли или иглы. Последние до и после употребления прокалива­ ются на пламени спиртовки. Прокаливается не только игла, но и та часть стеклянной трубочки, которая после посева вводится в сосуд. Затем произво­ дится посев колонии гриба, уже заранее выделенной и находящейся в другой пробирке. Берут в левую руку две пробирки (одну с колонией, другую - с пи­ тательной средой), иглу же, тщательно прокаленную, держат в правой руке. Пробирки слегка прогревают на спиртовке в месте соединения пробирки со стеклом; затем мизинцем правой руки, держа пробку из пробирки с культу­ рой гриба, а левой вращая пробирку, пробку открывают. После того как пробка открыта, её прогревают на спиртовке, плавным движением вводят иг­ лу внутрь пробирки, берут часть инфекционного начала и быстро переносят в засеваемую пробирку. Если инфекционное начало в виде гиф воздушного мицелия, отрывают несколько гиф, для точности иногда с помощью лупы, подставленной к пробирке. Если же хотят перенести часть погруженного ми­ целия, берут часть его с субстратом и переносят в засеваемую пробирку. Если слой среды очень крепкий, пользуются иглой-лопаткой. При посеве пробирку держат наклонённой вниз, чтобы споры из воздуха не загрязнили посев. Сам посев производится уколом в среду, штрихом, оставлением кусочка грибни­ цы или спор в верхней части среды; последнее лучше, так как в первом слу­ чае грибница начинает расти внутри укола и “портит” вид пробирки с обратной стороны. Если пересев производится из твёрдых сред в жидкие, то берут часть грибной колонии и переносят её в жидкую среду, стараясь не по­ гружать грибницы в жидкость, а оставляя её на жидкости. Если пересев производится из жидких сред на твёрдые или в жидкие, то осторожным прикосновением к колонии переносят споры в твёрдую или жидкую среды, или же посев производится с помощью пипетки Пастера. П о­ сле стерилизации пипетки перед посевом конец её обламывается стерильным пинцетом, часть инфекционного начала всасывается внутрь пипетки, а потом выдувается или в жидкую среду, или на твёрдую среду. Минуты через две жидкость сливают, предполагая, что разболтанные в ней споры остались на твёрдой среде. Иногда споры, разболтанные в пробирке с водой, просто вы­ ливаются на твёрдую среду, а затем сливаются с неё. Можно также споры на кончике иглы прямо переносить из жидкой среды на твёрдую. После пересева перед закрытием пробки её прожигают на горелке с обратной стороны, но очень осторожно, чтобы обуглившаяся вата не упала на среду и не загрязнила её. После пересева на пробирке пишут название гриба, число, месяц и год пересева и порядковый номер, указывающий на количество пересевов. С х ем а м етодов п о сева культур на п и тательн ы е среды . 1. Пересев из твёрдых сред в твёрдые: а) уколом; б) штрихом; в) оставлением кусочка грибницы или спор на поверхности среды. 2. Из твёрдых сред в жидкие: сбрасывание в жидкость кусочка грибницы или спор. 184