NED354493NED

а - количество NH 3 в анализируемой опытной почве, найденное по ка­ либровочному графику, мг; б - количество NH 3 в контрольной почве, найденное по калибровочному графику, мг; р - разведение; m - навеска почвы, г; 10 - коэффициент для пересчета на 10 г почвы. П р и м еч а н и е. Разведение окрашенных растворов не допускается. Анализ повторяют с меньшим объемом вытяжки. Окраска раствора сохраня­ ется не более 60 минут. 11.6.10. Определение активности аспарагиназы (L-аспарагин-амидогидролаза. КФ 3.5.1.1) Принцип метода. Аспарагиназа играет существенную роль в азоти­ стом обмене, катализируя превращение аспарагина - очень важного проме­ жуточного продукта обмена веществ в растениях и почве. Активность аспарагиназы отражает динамику азотистых органических соединений в поч­ ве. Аспарагиназа действует на амидную связь, катализирует гидролиз аспара­ гина на аспарагиновую кислоту и аммиак. Метод основан на измерении количества аммиака, образующегося при гидролизе аспарагина в почве. Ход анализа. Навеску просеянной воздушно-сухой почвы массой 5,0 г помещают в колбу объемом 50 см3, добавляют 10 см 3 фосфатного буфе­ ра (11,876 г N a 2 HPC >4 растворяют в дистиллированной безаммиачной воде, доводят объем в дистиллированной безаммиачной водой до 1 дм3; 9,078 г КН 2 Р 0 4 растворяют в дистиллированной безаммиачной воде и доводят объем до 1 дм3. Смешивают 400 см 3 раствора Na 2 H P 0 4 и 600 см 3 раствора КН 2 Р 0 4), 5 см 3 3 %-ного раствора аспарагина и 0,5 см 3 толуола. Колбу закрывают корко­ вой пробкой, встряхивают и ставят в термостат при температуре 37 °С на 24 часа. После инкубации в термостате содержимое колбы фильтруют через складчатый беззольный фильтр, перенося на фильтр сначала только жид­ кость. Затем в колбу приливают 15 см 3 1 н. раствора КС1, встряхивают 5 ми­ нут для вытеснения из почвы поглощенного аммиака и продолжают фильтровать, доводя объем фильтрата до 50 см3. Затем пипеткой берут 2-10 см 3 фильтрата в мерную колбу объемом 50 см3, разбавляют до 30 см 3 дистиллированной безаммиачной водой и пере­ мешивают. Приливают из бюретки 2 см 3 50 %-ного раствора сегнетовой соли, перемешивают, прибавляют 2 см 3 реактива Несслера, вновь перемешивают, доводят объем раствора дистиллированной безаммиачной водой до метки и перемешивают. Через 15-20 минут после перемешивания раствор колори- метрируют на фотоэлектроколориметре в кювете с толщиной просвечиваемо­ го слоя 20 мм при длине волны 450 нм (синий светофильтр). Количество аммиака находят по калибровочному графику. Построение калибровочного графика. В мерные колбы объемом 50 см 3 приливают определенное возрастающее количество рабочего образцо­ 112