NED354493NED

ков и нуклеиновых кислот. Конечным продуктом гидролиза мочевины явля­ ются аммиак NH3 и углекислый газ: С О (Ш 2)2 2NH3+ С 0 2+ Н20 . Метод основан на учете аммиака, образующегося при гидролизе мочеви­ ны. Ход анализа. В колбу емкостью 50 см3 помещают 5,0 г просеянной воздушно-сухой почвы, добавляют 10 см3 фосфатного буфера (pH 6,7) (11,876 г Na2H P 0 4 растворяют в дистиллированной безаммиачной воде в мерной колбе на 1 дм3 и доводят объем раствора дистиллированной безамми­ ачной водой до метки; 9,078 г КН2Р 0 4 растворяют в дистиллированной без­ аммиачной воде в мерной колбе на 1 дм3 и доводят объем раствора дистиллированной безаммиачной водой до метки. Смешивают 400 см3 рас­ твора Na2H P 0 4 и 600 см3 раствора КН2Р 0 4),Ю см3 10 %-ного раствора CO(NH2)2. Колбу закрывают корковой пробкой, встряхивают и ставят в тер­ мостат при температуре 37 °С на 24 часа. Контролем служит стерилизованная при температуре 180 °С в течение 3 часов почва. После инкубации в термостате содержимое колбы фильтруют через складчатый беззольный фильтр, перенося на фильтр сначала только жид­ кость. Затем в колбу приливают 15 см3 1,0 и. раствора КС1, встряхивают 5 минут для вытеснения из почвы поглощенного аммиака и продолжают фильтровать, доводя объем до 50 см3. Затем пипеткой берут 2-10 см3 фильтрата в мерную колбу объемом 50 см3, разбавляют до 30 см3 дистиллированной безаммиачной водой и пере­ мешивают. Приливают из бюретки 2 см3 50 %-ного раствора сегнетовой соли, перемешивают, прибавляют 2 см3 реактива Несслера, вновь перемешивают, доводят объем раствора дистиллированной безаммиачной водой до метки и перемешивают. Через 15-20 минут после перемешивания раствор колоримет- рируют на фотоэлектроколориметре при длине волны 450 нм (синий свето­ фильтр) в кювете с толщиной просвечиваемого слоя 20 мм. Количество аммиака находят по калибровочному графику. Построение калибровочного графика. В мерные колбы объемом 50 см3 приливают определенное возрастающее количество рабочего образцо­ вого раствора NH4C1 (запасной образцовый раствор: 0,382 г перекристаллизо- ванного NHjCl помещают в мерную колбу на 1 дм3, растворяют в дистиллированной безаммиачной воде и доводят объем этой водой до метки; рабочий образцовый раствор готовят разбавлением запасного образцового раствора в 10 раз), в 1 см3 которого содержится 0,01 мг аммиака. В дальней­ шем проводят те же операции как и при анализе опытной почвы. Н а оси абсциссы откладывают содержание аммиака в соответствую­ щем объеме рабочего образцового раствора, на оси ординаты - величины оп­ тической плотности. Вычисление результатов анализа. Активность уреазы рассчиты­ вают по формуле: X = (а—б)-р -10 771 где X - активность уреазы, мг NH3 на 10 г почвы за 24 часа; 111